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miRNeasy FFPE Kit (50)
カタログ番号 / ID. 217504
50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes, Proteinase K, RNase-Free DNase I, DNase Booster Buffer, RNase-Free Buffers, RNase-Free Water
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miRNeasy FFPE Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- miRNA とトータル RNA の効率的な精製
- ホルマリンによるクロスリンクを切断する新しい手法
- RNA分解がなく効率的にRNAを遊離
- わずか85 分でRNA が得られる能率化されたプロトコール
製品詳細
miRNeasy FFPE Kit は、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織切片から約18 ヌクレオチド（nt）以上のRNA を含むトータルRNA を精製します。本キットはリアルタイム定量RT-PCR のようなアプリケーションに利用できるmiRNA やその他のsmall RNA を含むRNA フラグメントを精製します。
パフォーマンス
miRNeasy FFPE Kitを用いたトータルRNAおよびmiRNAの収量と性能は、フェノール・クロロホルム抽出法や、他社の類似のキットを使用するmiRNA 精製法より優れています（図“ 効率的なリアルタイム定量RT-PCR”、 FFPE組織からの効率的なRNA精製”および“ 卓越した収量および性能”）。
図参照
原理
ホルマリン固定された組織では、ダウンストリームアプリケーションでRNA の性能を阻害するRNA・RNA およびRNA・タンパク質間のクロスリンキングが生じます。miRNeasy FFPE Kit は、特別な溶解およびインキュベーション条件によりRNA のホルマリンによるクロスリンキングを元に戻します。特別に開発された溶解バッファーは、組織切片からRNA を効率的に遊離し、さらにRNA 分解を防ぎます。最適な結合条件では、約18 ヌクレオチド以上のトータルRNA の精製を実現します。
操作手順
miRNeasy FFPE の全ての操作は、わずか85 分で完了します。至適化された溶解バッファーはRNA 収量を低減することなく、わずか15 分のProteinase K 分解でサンプル溶解が可能です。溶解後、サンプルを80 ℃で15 分間インキュベートし、ホルマリンによるクロスリンキングを元に戻します。その後、 DNase Booster Bufferとの至適化されたDNaseステップでゲノムDNAを迅速に除去し、RNeasy MinElute Spin Column を用いて高濃度なRNA を精製します（フローチャート“ miRNeasy FFPE操作手順”）。RNA をわずか14 ～ 30 μl で溶出するため、より少量の反応容量でダウンストリームアプリケーションを行なえます。
図参照
アプリケーション
miRNeasy FFPE Kit は、リアルタイム定量RT-PCR のような様々なアプリケーションで使用できるトータルRNA を含むmiRNA を精製します。
裏付けデータと数値
Efficient RNA purification from FFPE tissues.
Total RNA including miRNA was purified from the indicated rat tissues using either the miRNeasy FFPE Kit or phenol-chloroform extraction. Purified RNA was used as a template in quantitative, real-time RT-PCR assays for the miRNA miR-16. Results showed that for lung and liver tissues, CT values were lower after purification using the miRNeasy FFPE Kit, indicating that higher amounts of miRNA were purified than when using phenol-chloroform extraction. For kidney tissue, CT values were similar for both methods. CT values were similar or lower after purification using the miRNeasy FFPE Kit for all tissue types tested.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | PCR, qPRC, real-time RT-PCR, microArray |
| elutionvolume | 14-30 µl |
| purificationoftotalrnamirnapolyamrnadnaorprotein | miRNA, total RNA |
| sampleamount | up to 4 sections, each with a thickness up to 10 µm and a surface area up to 250mm^2 (automated protocol on QIAcube: up to 2 sections) |
| processing | Manual (protocol for automated processing on QIAcube available) |
| mainsampletype | FFPE tissue samples |
| format | Spin column |
| technology | Silica technology |
| yield | Varies |
リソース
パンフレット (7)
MSDS (1)
サイエンティフィック・ポスター (1)
クイックスタートプロトコール (2)
Application Notes (1)
キットハンドブック (1)
追加リソース (1)
Certificates of Analysis (1)