DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit

Das DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit ermöglicht die einfache, automatisierte Aufreinigung von DNA aus einer Vielzahl von rohen und verarbeiteten Lebensmitteln auf dem QIAcube HT System. Mit der bewährten DNeasy Silikamembran-Technologie im praktischen 96-Well-Format werden Verunreinigungen und Inhibitoren aus komplexen Lebensmittelmatrizes entfernt, um qualitativ hochwertige gebrauchsfertige DNA für nachgelagerte Analysen zu erhalten. Das Kit ist Teil des umfassenden Lebensmittel-Testportfolios von QIAGEN, zu dem auch Assays zum Nachweis von Pathogenen und GVO‑DNA sowie zur Authentifizierung von Inhaltsstoffen zählen.

Das DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit dient der schnellen, automatisierten Aufreinigung von DNA aus einer Vielzahl von rohen und verarbeiteten Lebensmittelmatrizes und minimiert gleichzeitig die Verschleppung von PCR-Inhibitoren, die in komplexen Lebensmittelproben auftreten können. Die DNeasy mericon Aufreinigungs-Kits bieten eine universell anwendbare Extraktionsmethode, die selbst beim Einsatz von stark inhibitorischen, hochverarbeiteten, fettigen und sauren Lebensmitteln sowie Lebensmitteln mit hohem oder niedrigem DNA-Gehalt zuverlässige Ergebnisse liefert (siehe Abbildung  Hohe DNA-Ausbeuten und minimale Verschleppung von Inhibitoren). Die QIAcube HT Plattform ermöglicht zusammen mit dem dedizierten DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit die automatisierte Aufreinigung von DNA aus Lebensmittelproben im mittleren bis hohen Durchsatzbereich. Jetzt ist es möglich, mit einem schnellen und einfachen automatisierten Verfahren die gleiche hochwertige DNA zu gewinnen wie mit dem manuellen DNeasy mericon Food Kit (siehe Abbildung  Aufreinigung von DNA aus Lebensmittelproben).

Das DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit ermöglicht die automatisierte Aufreinigung von Nukleinsäuren aus bis zu 300 mg Lebensmittel-Probenmaterial auf dem QIAcube HT Gerät. Das Verfahren liefert hochqualitative DNA, die sich gut für die PCR und andere nachgelagerte Applikationen eignet.
Das DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit kombiniert die selektiven Bindungseigenschaften einer silikabasierten Membran mit einem Hochdurchsatz-96-Well-Format und ist für die vollautomatisierte gleichzeitige Bearbeitung von 24–96 Proben auf dem QIAcube HT Gerät vorgesehen.

 

Das DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit nutzt ein modifiziertes Extraktionsverfahren mit Cetyltrimethylammoniumbromid (CTAB) für die schnelle automatisierte Aufreinigung von DNA aus Lebensmittelmatrizes auf dem QIAcube HT Gerät (siehe Abbildung  Effiziente und schnelle automatisierte DNA-Extraktion). Homogenisierte Lebensmittelproben werden für eine effiziente Lyse einem manuellen Vorbehandlungsschritt mit Food Lysis Buffer in Kombination mit Proteinase K unterzogen. Durch eine Chloroform-Extraktion werden alle CTAB-Protein-, CTAB-Zelltrümmer- oder CTAB-Polysaccharid-Komplexe entfernt. Die DNA-haltige wässrige Phase wird in einen 96-Well-S-Block überführt. Alle nachfolgenden Aufreinigungsschritte werden auf dem QIAcube HT Gerät automatisiert.
QIAcube HT fügt Puffer PB zur wässrigen Phase hinzu und überführt das Gemisch auf die DNeasy 96 Plate. Bei angelegtem Vakuum werden die Nukleinsäuren auf die Silikamembran adsorbiert, während Verunreinigungen durchfließen. Durch Waschen werden alle verbliebenen Verunreinigungen und Inhibitoren entfernt, und die DNA wird in Buffer EB eluiert. Die so aufgereinigte DNA kann direkt in einem nachgelagerten mericon Real-time PCR-Assay verwendet werden.

Das DNeasy mericon 96 QIAcube HT Kit liefert hochqualitative DNA aus einer Vielzahl von rohen und verarbeiteten Lebensmittelmatrizes und minimiert gleichzeitig die Verschleppung von PCR-Inhibitoren, die in komplexen Lebensmittelproben auftreten können. Die aufgereinigte DNA eignet sich für verschiedene nachgelagerte Applikationen:

• Lebensmittelsicherheits- und Qualitätstests
• Authentifizierung von Inhaltsstoffen
• Nachweis gentechnisch veränderter Organismen
• Nachweis potenzieller Allergene