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Qproteome Cell Compartment Kit
N.º de cat. / ID. 37502
Para un máximo de 10 fraccionamientos subcelulares: Extraction Buffer, Protease Inhibitor Solution, Benzonase®.
El Qproteome Cell Compartment Kit está concebido para su uso en aplicaciones de biología molecular. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.
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Detalles del producto
Las células eucariotas son sistemas complejos, bien ordenados y muy estructurados. El Cell Compartment Kit está diseñado para el fraccionamiento subcelular rápido y sencillo de células y tejidos eucariotas intactos. Por una adición secuencial de distintos tampones de extracción al sedimento de la célula, las proteínas de los distintos compartimentos celulares se pueden aislar selectivamente.
Rendimiento
El uso del Qproteome Cell Compartment Kit permite una localización sencilla y eficaz de proteínas marcadoras específicas de compartimentos celulares a partir de células aisladas (consulta la figura « Separación específica de proteínas marcadoras» y « Localización de proteínas en células en diferentes condiciones de crecimiento») o de muestras de tejido (consulte la figura « Localización de proteínas en muestras de tejido»).
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Principio
El kit contiene 4 Extraction Buffers que permiten el aislamiento secuencial de las proteínas asociadas con el citosol, las membranas, el núcleo y el citoesqueleto a partir de lisados o tejidos celulares.
Procedimiento
Los 4 Extraction Buffers se añaden secuencialmente a un sedimento celular y las fracciones respectivas se aíslan por la centrifugación (consulte el diagrama de flujo).
En un protocolo alternativo para los tejidos, las muestras se homogenizan al mismo tiempo y se separan con el TissueRuptor antes de procesarse por sedimento celular.
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Aplicaciones
El fraccionamiento celular de proteínas se puede utilizar para el enriquecimiento de especies de baja abundancia, para definir la localización subcelular de las enzimas, proteínas reguladoras y estructurales y para supervisar la redistribución compartimental de biomoléculas en condiciones basales y estimuladas.
Datos y cifras de respaldo
Localización de proteínas en las células en diferentes condiciones de crecimiento.
Micrografías (paneles superiores) de células HeLa [A] en condiciones normales de crecimiento y [B] tras 4 horas de incubación con estaurosporina, un inductor de la apoptosis. Los paneles inferiores muestran western blots preparados tras procesar lisados celulares con el Qproteome Cell Compartment Kit. Los blots se probaron con anticuerpos anti-citocromo c. Se sabe que durante la apoptosis el citocromo c se transloca del espacio entre las membranas de las mitocondrias al citosol, un proceso que se refleja en la detección de citocromo c en la fracción citosólica de las células apoptóticas.
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
|---|---|
| applications | SDS-PAGE, espectrometría de masas |
| fractionsisolated | Cuatro fracciones |
| startmaterial | Lisado celular |
| samplesize | ~ 5 x 10e6 células |
| bindingcapacityyield | Varía |
| species | Eucariotas |
Recursos
Safety Data Sheets (1)
Kit Handbooks (2)
Technical Information (1)
Quick-Start Protocols (1)
Scientific Posters (1)
Certificates of Analysis (1)