FastLane Cell cDNA Kit
快速制备用于定量RT-PCR的cDNA，无需RNA纯化
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FastLane Cell cDNA Kit (50)
目录编号 / ID. 215011
Buffer FCW, Buffer FCP, and components for 50 x 20 µl reverse-transcription reactions (gDNA Wipeout Buffer, Quantiscript Reverse Transcriptase, Quantiscript RT Buffer, RT Primer Mix, and RNase-Free Water)
FastLane Cell cDNA Kit 旨在用于分子生物学应用。该产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。
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特点
- 由细胞制备cDNA只需四个步骤，45分钟内即可完成
- 高灵敏度检测低丰度转录产物
- 易于同时处理多个样本
- 整合的gDNA去除步骤确保只检测RNA
- 无需设计RNA特异性引物或探针
产品详情
FastLane Cell cDNA Kit提供由培养细胞直接制备cDNA的方法，操作快速简单，无需纯化RNA。试剂盒提供洗涤和裂解缓冲液，以获得含有RNA的裂解液，同时应用gDNA Wipeput Buffer可去除基因组DNA污染，同时提供用于快速、高效合成cDNA的所有反应组分。该试剂盒适用于需要快速、高通量进行基因表达分析的实验。
绩效
FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA可以使两步法定量PCR得到高灵敏度、高重现性的检测结果（参见" Superior sensitivity in cancer research"和" Highly reproducible cDNA preparation"）。高品质的cDNA同样可用于对大于105个细胞到单个细胞进行检测。
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原理
FastLane Cell cDNA Kit使用FastLane技术可在45分钟内直接由培养细胞制备得到cDNA。为确保real-time RT-PCR只检测到RNA，可使用创新的gDNA Wipeout Buffer去除基因组DNA（参见" Effective elimination of genomic DNA contamination"）。无需设计RNA特异性引物或探针，节约时间和精力。
FastLane Cell cDNA Kit配合优化的QuantiTect、QuantiFast或Rotor-Gene Kits进行real-time RT-PCR，可在数小时内轻松处理并分析细胞样本。由此可对实验的若干转录产物进行快速检测，例如验证siRNA介导的基因沉默效果（参见" Successful analysis of CDC2 knockdown"）。
FastLane Cell cDNA Kit是FastLane Kits的一部分，可加快并实现无缝的基因表达分析流程。
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程序
FastLane Cell cDNA Kit直接由培养细胞制备cDNA，只需4个步骤即可在45分钟内获得cDNA：细胞洗涤、细胞裂解并稳定RNA、基因组DNA去除和合成cDNA。制备的cDNA可直接用于两步法real-time RT-PCR。
该试剂盒提供足量用于24孔细胞培养板或48孔细胞培养板制备cDNA的试剂，如果应用96孔细胞培养板，需要额外购买QuantiTect Reverse Transcription Kit（50）。
FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA，可使用下列QuantiTect Kits中的一种通过两步法real-time RT-PCR进行分析：
- SYBR® Green检测：QuantiTect SYBR® Green PCR Kit
- 探针：QuantiTect Probe PCR Kit
- 多重探针检测：QuantiTect Multiplex PCR Kits
FastLane Cell cDNA Kit配合QuantiFast Kit使用可进行快速的两步法real-time RT-PCR：
- SYBR® Green检测：QuantiFast SYBR® Green PCR Kit
- 探针检测：QuantiFast Probe PCR Kits
- 多重探针检测：QuantiFast Multiplex PCR Kits
使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪对FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA进行分析时，应用如下Rotor-Gene Kits可进行超快速的两步法real-time RT-PCR：
- SYBR® Green检测：Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit
- 探针检测：Rotor-Gene Probe PCR Kit
- 多重探针检测：Rotor-Gene Multiplex PCR Kits
QuantiTect及QuantiFast Kits与多种real-time热循环仪兼容，包括Applied Biosystems提供的仪器。
应用
FastLane Cell cDNA Kit适用于需要对在各转录本水平进行快速检测的实验，包括:
- 验证siRNA介导的基因沉默效果
- 评估药物效果
- 基因调控检测
辅助数据和图表
Superior sensitivity in cancer research.
In real-time two-step RT-PCR analysis of various genes important to cancer research in HeLa cells, lower CT values were achieved when cDNA was prepared with the FastLane Kit instead of a similar kit from Supplier AIV.
规格
| 特点 | 规格 |
|---|---|
| applications | Real-time, two-step RT-PCR, gene expression analysis directly from cells |
| withwithouthotstart | Without hotstart |
| enzymeactivity | Reverse transcription |
| reactiontype | cDNA production, DNA digestion |
| mastermix | No |
| realtimeorendpoint | Real-time, two-step RT-PCR |
| sampletargettype | Cultured cells |
| singleormultiplex | Single |
资源
试剂盒操作手册 (1)
安全数据表 (1)
基因表达分析 (1)
Certificates of Analysis (1)