QIAquick PCR Purification Kit para limpieza de PCR

• Hasta 95 % de recuperación de ADN listo para usarse
• Limpieza de ADN de hasta 10 kb en tres sencillos pasos
• Colorante de carga de gel para el análisis práctico de muestras
• Kit combinado para la extracción en gel y la limpieza de PCR
• Las columnas de centrifugación están disponibles por separado 

El QIAquick PCR Purification Kit incluye columnas de centrifugación, tampones y tubos de recogida para la purificación basada en membrana de gel de sílice de productos de PCR >100 bp. Se purifica el ADN de hasta 10 kb mediante un procedimiento sencillo y rápido de unión, lavado y elución y un volumen de elución de 30–50 μl. Un indicador de pH opcional permite determinar con facilidad el pH óptimo para la unión de ADN a la columna de centrifugación. El procedimiento se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect.

Para obtener resultados óptimos, se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

Los protocolos estándar de QIAquick PCR Purification también pueden llevarse a cabo mediante el uso del sistema TRACKMAN Connected, combinado con las pipetas PIPETMAN M Connected, ambos de Gilson. El sistema TRACKMAN Connected orienta a los investigadores a lo largo de los protocolos de QIAquick PCR Purification al tiempo que se ajustan automáticamente los parámetros de la pipeta PIPETMAN M Connected con Bluetooth. Cada paso de la ejecución del protocolo se registra para acelerar la elaboración de informes mediante la generación de un informe completo de la serie. Descargar más información.

Los kits QIAquick contienen un ensamblaje de membrana de sílice para la unión del ADN en tampón de alta salinidad y elución con tampón de baja salinidad o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceites minerales, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN (consulte la figura « Eliminación completa de cebadores tras la PCR»). La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes relacionados con las resinas sueltas y los residuos pastosos. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promover la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Colorante de carga de gel

Para que el procesamiento y el análisis de las muestras sean más rápidos y prácticos, se proporciona el colorante de carga de gel. El GelPilot Loading Dye contiene tres colorantes de seguimiento (xileno cianol, azul de bromofenol y naranja G) para facilitar la optimización del tiempo de la serie del gel de agarosa y evitar que los fragmentos más pequeños de ADN migren demasiado lejos (consulte la figura « GelPilot Loading Dye »).

El sistema QIAquick emplea un procedimiento sencillo de unión, lavado y elución (consulte el diagrama de flujo « Procedimiento de QIAquick y MinElute»). El tampón de unión se añade directamente a la muestra de PCR u otras reacciones enzimáticas y la mezcla se aplica a la QIAquick Spin Column. El tampón de unión contiene un indicador de pH, lo que permite determinar con facilidad el pH óptimo para la unión del ADN (consulte la figura  «Colorante indicador de pH»). Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad generadas por el tampón. Se lavan las impurezas y el ADN puro se eluye con un volumen bajo del tampón de baja salinidad suministrado o de agua, listo para usarse en todas las aplicaciones posteriores.

Manejo

Las QIAquick Spin Columns se han diseñado con dos prácticas opciones de manejo. Las columnas de centrifugación se adaptan a una microcentrifugadora de mesa convencional o a cualquier colector de vacío con conectores Luer, como QIAvac 24 Plus con QIAvac Luer Adapters. El QIAquick PCR Purification Kit, junto con otros kits basados en columnas de centrifugación de QIAGEN, se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube, lo que permite incrementar la productividad y la normalización de los resultados (consulte las figuras «Opciones de manejo de la columna de centrifugación  A,  B,  C y  D» y « QIAcube Connect»).

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema QIAquick están listos para su uso directo en diversas aplicaciones, incluyendo la secuenciación, el análisis de micromatrices, la ligación y transformación, la digestión de restricción, el marcado, la microinyección, la PCR y la transcripción in vitro.