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FlexiGene DNA Kit (250)
N.º de cat. / ID. 51206
Para el aislamiento de ADN genómico a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo en un solo tubo con preparación rápida del kit
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Este producto contiene sustancias reguladas por el REACH (CE 1907/2006 Anexo XIV). El uso de este producto en la UE está permitido previa exención (artículo 56 [3]). Para más información, consulte la notificación del REACH y la hoja de datos de seguridad de este producto, que encontrará en la sección “Recursos” de esta página.
El FlexiGene DNA Kit está concebido para su uso en aplicaciones de biología molecular. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.
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Características
- Fácil manipulación, sin riesgo de confusión de muestras
- Purificación escalable de 0,1-20 ml de sangre total
- Purificación directa de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo
- Procedimiento rápido
- Sin extracción orgánica
Detalles del producto
El sistema FlexiGene utiliza centrifugación simple para aislar ADN de alta pureza a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo. El FlexiGene DNA Kit contiene tampones y QIAGEN Protease para la purificación simple y directa en un solo tubo. Para obtener información sobre soluciones automatizadas con los reactivos FlexiGene, póngase en contacto con Autogen, Inc.
Rendimiento
El ADN purificado con el sistema FlexiGene tiene un tamaño de hasta 150 kb (consulte la figura « ADN genómico de gran calidad»). Tiene un buen desempeño en los experimentos de amplificación y transferencia de Southern (Southern blot) y también es adecuado para el archivado (consulte la figura « Análisis de PCR posterior eficaz»).
El ADN se purifica a partir de 0,1-20 ml (sangre), 0,1-2 ml (capa leucoplaquetaria), o 1-2 × 106 células (células en cultivo) en un solo tubo, procesadas mediante centrifugación. Se pueden procesar doce muestras en 1 hora. En función del tamaño de la muestra, el volumen de rehidratación es 0,2-1 ml.
| Muestra | Volumen | Valores de ADN (µg) |
|---|---|---|
| Sangre* | 0,3 ml | 11-14 |
| Sangre* | 2,0 ml | 75-90 |
| Sangre* | 10,0 ml | 380-460 |
| Capa leucoplaquetaria | 0,5 ml | 110-130 |
| Células HeLa | 106 células | 25-35 |
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Principio
El sistema FlexiGene DNA permite el aislamiento de ADN genómico a partir de cantidades variables de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo. El procedimiento simple de purificación se lleva a cabo en un solo tubo, lo que reduce los costes y simplifica la manipulación. El ADN purificado tiene un buen desempeño en aplicaciones posteriores sensibles.
Procedimiento
El primer paso es la adición del tampón de lisis a las muestras (consulte el organigrama « Procedimiento del ADN FlexiGene»). Los núcleos celulares y las mitocondrias se eliminan mediante centrifugación y se resuspenden en un tampón desnaturalizante que contiene QIAGEN Protease. Tras la digestión de las proteínas, el ADN se precipita mediante la adición de isopropanol, se recupera mediante centrifugación, se lava en etanol al 70 % y se seca. El ADN se resuspende en tampón de hidratación y está listo para el uso directo en ensayos posteriores o para su almacenamiento a –20 ºC. Se obtiene ADN de alto rendimiento a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo (consulte la tabla «Rendimiento del ADN purificado a partir de diferentes tipos de muestras mediante el procedimiento FlexiGene»).
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Aplicaciones
El ADN purificado con el FlexiGene DNA Kit tiene un buen desempeño en las aplicaciones posteriores, que incluyen:
- PCR
- Transferencia de Southern (Southern blot)
- Archivado
Datos y cifras de respaldo
Procedimiento del ADN FlexiGene
El primer paso es la adición del tampón de lisis a las muestras. Los núcleos celulares y las mitocondrias se eliminan mediante centrifugación y se resuspenden en un tampón desnaturalizante que contiene QIAGEN Protease. Tras la digestión de las proteínas, el ADN se precipita mediante la adición de isopropanol, se recupera mediante centrifugación, se lava en etanol al 70 % y se seca. El ADN se resuspende en tampón de hidratación y está listo para el uso directo en ensayos posteriores o para su almacenamiento a –20 ºC.
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
|---|---|
| applications | Técnicas de PCR, digestión de restricción, transferencia de Southern, secuenciación |
| sampleamount | 100 µl-20 ml |
| format | Escalable |
| timeperrunorperprep | 25-45 minutos (+ rehidratación de ADN) |
| mainsampletype | Sangre total, capa leucoplaquetaria, células en cultivo |
| technology | Método de precipitado en un solo tubo |
| processing | Manual |
| yield | 35 µg/ml de sangre total |
| purificationoftotalrnamirnapolyamrnadnaorprotein | ADN genómico |
| elutionvolume | 200 µl-1000 µl |
Recursos
Kit Handbooks (1)
Additional Resources (1)
Supplementary Protocols (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publicaciones
The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205