FastLane Cell cDNA Kit

RNA精製なしにリアルタイムRT-PCRに使用できるcDNAを迅速に調製

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FastLane Cell cDNA Kit (50)

カタログ番号 / ID.   215011

Buffer FCW, Buffer FCP, and components for 50 x 20 µl reverse-transcription reactions (gDNA Wipeout Buffer, Quantiscript Reverse Transcriptase, Quantiscript RT Buffer, RT Primer Mix, and RNase-Free Water)
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FastLane Cell cDNA Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • わずか4ステップ、45分以下で細胞からcDNAを精製
  • 発現量の低い転写物でも高感度で検出
  • 複数のサンプルを簡単に同時処理可能
  • gDNA除去が組み込まれているため、RNAだけを検出可能
  • RNA特異的なプライマーやプローブのデザイン不要

製品詳細

FastLane Cell cDNA Kitは、RNA精製を行なわずに直接培養細胞から迅速で簡単な一本鎖cDNAの調製を実現します。本キットにはライセート調製とRNA安定化のための洗浄および溶解バッファー、混入したゲノムDNA除去用gDNA Wipeout Buffer、迅速で効率的なcDNA合成用反応液が全て含まれています。FastLane Cell cDNA Kitは迅速でハイスループットな遺伝子発現解析が必要な実験に最適です。

パフォーマンス

FastLane Cell cDNA Kitで合成したcDNAは2ステップリアルタイムRT-PCRで感度および再現性の高い結果を実現します(図" がん研究において最高の感度を実現"、" 再現性の高いcDNA調製")。この高品質cDNAを用いて幅広い細胞数(1から105以上)の範囲でも検出を行なうことができます。
図参照

原理

FastLane Cell cDNA KitはFastLane技術を利用し、培養細胞からわずか45分で直接cDNAを調製します。リアルタイムRT-PCRにおいてRNAのみを確実に検出するため、ゲノムDNAの除去に革新的なgDNA Wipeout Bufferを使用しています(図" ゲノムDNAコンタミを効率的に除去")。RNA特異的なプライマーあるいはプローブをデザインする必要がなく、時間および労力を節約できます。

リアルタイムRT-PCRに至適化済みのQuantiTect、QuantiFast、またはRotor-Gene KitsをFastLane Cell cDNA Kitと共に使用することにより、複数の細胞サンプルを数時間以内に容易に処理し、解析することができます。従って、siRNAによる遺伝子発現ノックダウンの検証のような実験において、複数の転写物のスナップショットが可能です(図" CDC2ノックダウンの優れた解析結果")。

FastLane Cell cDNA Kitは、遺伝子発現解析ワークフローのスピードアップと能率化を実現するFastLane製品の1つです。

図参照

操作手順

FastLane Cell cDNA Kitを用いて、細胞洗浄、RNAの安定化を組み込んだ細胞溶解、ゲノムDNAの除去、cDNA合成の4ステップの操作で、培養細胞からわずか45分でcDNAが得られます。合成されたcDNAは2ステップリアルタイムRT-PCRに即使用できます。

本キットには24ウェル細胞培養プレート2枚、あるいは48ウェル細胞培養プレート1枚でcDNAを調製するために十分な量の試薬が入っています。96ウェル細胞培養プレートで調製を行なう場合には、QuantiTect Reverse Transcription Kit(50)を追加購入する必要があります。

FastLane Cell cDNA Kitで調製したcDNAは、以下のQuantiTect Kitシリーズの1つを用いて2ステップリアルタイムRT-PCRで解析できます。

  • SYBR® Green検出:QuantiTect SYBR® Green PCR Kit
  • プローブ検出:QuantiTect Probe PCR Kit
  • マルチプレックスプローブ検出:QuantiTect Multiplex PCR Kits

あるいは、FastLane Cell cDNA KitをQuantiFast Kitと組み合わせて2ステップ高速リアルタイムRT-PCRを行なうことも可能です。

  • SYBR® Green検出:QuantiFast SYBR® Green PCR Kit
  • プローブ検出:QuantiFast Probe PCR Kits
  • マルチプレックスプローブ検出:QuantiFast Multiplex PCR Kits

FastLane Cell cDNA Kitで調製したcDNAを、以下のような専用Rotor-Gene Kitを用いてRotor-Gene Qサイクラーで解析すると、超高速2ステップリアルタイムRT-PCRを行なうことができます。

  • SYBR® Green検出:Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit
  • プローブ検出:Rotor-Gene Probe PCR Kit
  • マルチプレックスプローブ検出:Rotor-Gene Multiplex PCR Kit 

QuantiTectおよびQuantiFast KitはApplied Biosystems社の装置を含む様々なリアルタイムサイクラーで使用可能です。

アプリケーション

FastLane Cell cDNA Kit は以下のような実験に適しています。

  • siRNAによる遺伝子ノックダウンの検証
  • 薬剤効果の評価
  • 遺伝子制御の検出

裏付けデータと数値

仕様

特徴仕様
applicationsReal-time, two-step RT-PCR, gene expression analysis directly from cells
withwithouthotstartWithout hotstart
enzymeactivityReverse transcription
reactiontypecDNA production, DNA digestion
mastermixNo
realtimeorendpointReal-time, two-step RT-PCR
sampletargettypeCultured cells
singleormultiplexSingle

リソース

キットハンドブック (1)
For high-speed preparation of first-strand cDNA directly from cultured cells without RNA purification. For use in real-time, two-step RT-PCR
パンフレット (1)
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Certificates of Analysis (1)