QuantiTect Virus Kit

适用于高灵敏度检测病毒 RNA 或 DNA

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QuantiTect Virus Kit (1000)

目录编号 / ID.   211015

适用于 1000 次 50 µl 反应:QuantiTect Virus Master Mix(含 ROX 染料)、QuantiTect Virus RT Mix、RNase-Free Water、QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer
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基准染料
Rox in Mastermix
Rox in vial
反应
1000
200
50
QuantiTect Virus Kit 旨在用于分子生物学应用。这些产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。

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特点

  • 高灵敏度的单重和多重检测
  • 在同一反应中检测病毒 RNA 或 DNA
  • 明确地检测微弱的阳性信号
  • 快速的通用 2 步法实验方案
  • 5x 浓度预混液,用于通过提高样品的投入量而提高灵敏度

产品详情

QuantiTect Virus Kit 专门设计用于使用序列特异性探针,通过多重、实时一步法 RT-PCR 高灵敏度地检测多达 4 个病毒核酸靶标。可在一管反应中检测多个病毒 RNA 或 DNA 靶标以及内质控而不会降低灵敏度。5x 浓度的预混液可提高样品的投入量,并含有 HotStarTaq Plus DNA Polymerase。QuantiTect Virus RT Mix 含有 Sensiscript Reverse Transcriptase 的独特配方,针对高灵敏度病毒 RNA 检测进行了优化。有两种试剂盒形式可供选择:适用于需要 ROX 染料进行荧光归一化处理的定量 PCR 仪的 QuantiTect Virus Kit;适用于其他定量 PCR 环仪的 QuantiTect Virus +ROX Vial Kit。为方便起见,预混液可存放在 2-8°C 环境下。

绩效

使用 QuantiTect Virus Kit 进行扩增时,即使模板量低而 CT 值高,也能在一定稀释度范围内呈现陡峭的 S 形曲线(请参阅图“  在宽动态范围内明确测定 CT”)。这样就能在 Real-time PCR 中准确测定病毒核酸定量的 CT 值。

多重检测可在宽线性范围内检测多个病毒 RNA 或 DNA 靶标及内质控而不会降低灵敏度(请参阅图“ 在宽线性范围内可靠地检测病毒 RNA”和“   改善了低载量病毒 RNA 的检测”)。

试剂盒附带的 QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer 可在稀释和反应设置过程中稳定 RNA 和 DNA 标准品,并防止反应管或移液器吸头等塑料表面的核酸残留。该缓冲液可对用于病毒核酸定量的标准品进行可靠的稀释,从而提供从低到高 CT 值的宽线性范围,并确保标准品长期保存而不会发生降解(请参阅图“ 可靠的 RNA 标准品稀释和存放”)。

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原理

QuantiTect Virus Kit 可在单重或多重检测中首次尝试便能实现高灵敏度的病毒核酸检测(请参阅流程图“ QIAGEN 多重试剂盒”)。经优化的预混液可确保多重反应中 PCR 产物的扩增效率和灵敏度与相应单重扩增反应中的 PCR 产物相同。

在同一而非独立反应中扩增对照品和靶标基因可尽量减少操作错误,从而提高基因定量的可靠性。QuantiTect Virus Buffer 包含 K+ 和 NH4+ 离子的均衡组合以及独特的 Synthetic Factor MP,它们能共同促进引物和探针稳定且高效地退火到核酸模板,从而提高 PCR 的效率(请参阅图“ 独特的 PCR 缓冲液”)。此外,Sensiscript Reverse Transcriptase 的独特配方可确保病毒 RNA 的高灵敏度逆转录,而 HotStarTaq Plus DNA Polymerase 可提供严格的热启动,防止形成非特异性产物。

QuantiTect Virus Kit 的组分
试剂盒组成特点优势
5x QuantiTect Virus Master Mix浓缩预混液高度浓缩,专为灵敏的病毒检测而优化可在检测中加入更大体积的模板以提高灵敏度
HotStarTaq Plus DNA Polymerase在 95ºC 下 5 分钟活化在室温下配制 qPCR 反应
QuantiTect Virus BufferNH4+ 和 K+ 离子的平衡组合特异性引物退火确保可靠的 PCR 结果
Synthetic Factor MP可在一管反应中对多达 4 个基因进行可靠的多重分析
其他试剂盒组分QuantiTect Virus RT Mix含有 Sensiscript Reverse Transcriptase 的独特配方针对病毒 RNA 的高灵敏度检测进行了优化
QuantiTect 核酸稀释缓冲液用于稀释和保存核酸标准品的专有缓冲液制剂。在稀释和反应设置过程中稳定 RNA 和 DNA 标准品,并防止反应管或移液器吸头等塑料表面的核酸残留
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程序

QuantiTect Virus Kit 使用序列特异性探针对病毒核酸(RNA 和/或 DNA)和内质控进行高灵敏度的 Real-time PCR 分析。反应可在包含或不包含逆转录步骤的情况下进行,从而可灵活设计多重检测来检测 RNA 靶标、DNA 靶标或同时检测 RNA 和 DNA 靶标。请按照手册中的方案来获得快速可靠的结果。

试剂盒提供时预混液中可包含或不含 ROX 参比荧光染料(见表)。

选择合适的 QuantiTect Virus Kit
ROX 染料试剂盒兼容的定量 PCR 仪
在预混液中提供QuantiTect Virus KitApplied Biosystems 除 Applied Biosystems 7500 外的所有定量 PCR 仪
以单管形式提供QuantiTect Virus +ROX Vial KitApplied Biosystems 7500 和来自
Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、QIAGEN、Roche、Agilent 及其他供应商的定量 PCR 仪

对于快速、高灵敏度的终点一步法 RT-PCR 应用(包括病毒检测),我们建议使用 QIAGEN OneStep RT-PCR Kit。

应用

QuantiTect Virus Kit 使用序列特异性探针提供高灵敏度的实时单次或多重 PCR 或一步法 RT-PCR,用于检测病毒 DNA、RNA 以及内质控。这些试剂盒可用于多种实时定量 PCR 仪,包括来自 Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、QIAGEN、Roche(毛细管定量 PCR 仪除外)和 Agilent 的仪器。

辅助数据和图表

规格

特点规格
applications病毒检测
sybrgreeniorsequencespecificprobes序列特异性探针
realtimeorendpoint实时
reactiontype逆转录和 PCR
thermalcycler大多数实时定量 PCR 仪(毛细管定量 PCR 仪除外,例如 LightCycler® 1.x 和 2.0)
sampletargettypeRNA 或 DNA 靶标
withorwithoutrox可以含 ROX 的预混液以及独立小管包装的 ROX 形式提供
singleormultiplex单重或多重

资源

产品介绍与指南 (1)
Now with even more applications!
安全数据表 (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
试剂盒操作手册 (1)
For highly sensitive real-time singleplex or multiplex PCR or one-step RT-PCR using sequence-specific probes for detection of viral DNA and RNA and internal controls
Certificates of Analysis (1)