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AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit (50)
カタログ番号 / ID. 80004
For 50 preps: AllPrep DNA Spin Columns, RNeasy Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Reagents and Buffers
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AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- 貴重なサンプルから各分析対象物を最大量回収
- 簡単で効率的なプロトコールにより時間を節約
- 同一サンプルから分析物が得られ、データの比較が可能
- フェノールやアセトンのような有機溶媒が不要
製品詳細
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit は同一の細胞あるいは組織サンプルから同時にDNA、RNA、タンパク質を精製できます。本キットとAllprotect Tissue Reagentを組み合わせて使用することで、組織サンプルのDNA、RNA、タンパク質を迅速に安定化し、凍結することなく長期保存が可能になります。これらの組織はTissueRuptorあるいはTissueLyser IIを用いて効果的に破砕できます。
パフォーマンス
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kitを用いて精製したゲノムDNAおよびトータルRNAは、リアルタイムPCRやリアルタイムRT-PCR解析に最適です（図 " 信頼できるリアルタイムPCR/RT-PCR解析"）。本キットを用いて精製したトータルタンパク質はSDS-PAGE およびウェスタンブロットに適しています（図 信頼できるウェスタンブロットおよびSDS-PAGE）。
図参照
原理
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit によりシステムバイオロジーのためのサンプル調製を標準化できます。同一のサンプルからDNA、RNA、タンパク質を全て調製できるため、別々のサンプルからこれらの分析物を調製する際に起こるばらつきを排除できます。精製操作の前にサンプルを3つに分割する必要がなく、DNA、RNA、タンパク質を最も効率よく回収できます。さらに、フェノールやアセトンのような有機溶媒も不要です。
操作手順
最初にプロテアーゼ、DNase、RNaseを即座に不活性化するBuffer RLTで細胞あるいは組織を溶解し、ホモジナイズするので、分解のないDNA、RNA、タンパク質の分離ができます。ライセートをAllPrep DNA Spin cloumnにアプライし通過させます。高塩濃度バッファーと組み合わせることにより、カラムはゲノムDNAを選択的かつ効率的に結合させます。カラムを洗浄し、即使用できる高純度なDNAを溶出します。
AllPrep DNA Spin cloumnからのろ液にエタノールを添加することでRNAの最適な結合条件にし、このサンプルをRNeasy Spin cloumnにアプライします。 トータルRNAはこのカラムのメンブレンに結合し、洗浄により夾雑物は効果的に除去されます。高品質なRNAをRNaseフリー水で溶出します。
RNeasy Spin cloumnからのろ液に、新規の水溶性タンパク質沈殿溶液であるBuffer APPを添加し、沈殿したタンパク質を遠心操作によりペレット化します。分解のないトータルタンパク質を適切なバッファーで再溶解した後、ダウンストリームアプリケーションにすぐに使用できます。本キットにはタンパク質ペレットを溶解しSDS-PAGEに使用できるBuffer ALOが入っています（フローチャート " AllPrep DNA/RNA/Protein 操作手順"） 。
図参照
アプリケーション
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit は、同一の細胞や組織サンプルからDNA、トータルRNA、タンパク質を同時に精製し、効率的なサンプル調製を実現します。本キットを用いて精製したトータルタンパク質はSDS-PAGE およびウェスタンブロットに最適です。AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit を用いて精製したゲノムDNAおよびトータルRNAは以下のようなアプリケーションを含む全てのアプリケーションに最適です。
- リアルタイムPCR解析
- リアルタイムRT-PCR解析
裏付けデータと数値
Reliable real-time PCR and RT-PCR analyses.
Rat tissues were stabilized in Allprotect Reagent, and DNA and RNA were purified using the AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit. The CT values in real-time PCR and real-time RT-PCR analyses were similar to those achieved with tissues stabilized in liquid nitrogen.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | PCR, RT-PCR,real-time PCR, real-time RT-PCR, Southern-,Northern-,Western Blotting, Microarrays, Genotyping,1D and 2D gel electrophoresis |
| mainsampletype | Easy-to-lyse tissue or cells |
| elutionvolume | RNA: 30 - 50µl, DNA: 100 - 200µl |
| purificationoftotalrnamirnapolyamrnadnaorprotein | Total RNA, genomic DNA and western-grade proteins |
| format | Spin column |
| yield | varies, depends on sample type |
| timeperrunorperprep | 60 min |
| processing | Manual (centrifugation) |
| technology | Silica technology, Protein precipitation |
| sampleamount | up to 30 mg tissue or 1 x 10e7 cells |
リソース
キットハンドブック (1)
クイックスタートプロトコール (1)
パンフレット (1)
Supplementary Protocols (1)
テクニカルインフォメーション (1)
MSDS (1)
Certificates of Analysis (1)