QIAquick Gel Extraction Kit (purificación de geles)

• Hasta 95 % de recuperación de ADN listo para usarse
• Procedimiento rápido y práctico
• Limpieza de ADN de hasta 10 kb en tres sencillos pasos
• Colorante de carga de gel para el análisis práctico de muestras
• Kit combinado para la extracción en gel y la limpieza de PCR

El QIAquick Gel Extraction Kit incluye columnas de centrifugación, tampones y tubos de recogida para la purificación basada en membrana de gel de sílice de fragmentos de ADN a partir de geles (cortes de hasta 400 mg) o reacciones enzimáticas. Se purifica el ADN que oscila entre 70 bp y 10 kb mediante un procedimiento sencillo y rápido de unión, lavado y elución y un volumen de elución de 30–50 µl. El indicador de pH integrado permite la fácil determinación del pH óptimo para la unión del ADN en la columna de centrifugación. El QIAquick PCR & Gel Cleanup Kit también proporciona tampones para la purificación de productos de PCR >100 bp y ADN de hasta 10 kb. El procedimiento se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect.

Para obtener resultados óptimos, se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

El QIAquick Gel Extraction Kit permite eliminar nucleótidos, enzimas, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras, lo que garantiza hasta un 80 % de recuperación de ADN (consulte la figura « Recuperaciones altas a partir de geles»). Con el uso de una microcentrifugadora o un colector de vacío, se purifica el ADN que oscila entre 70 bp y 10 kb de 1–24 muestras. El ADN purificado se puede utilizar, por ejemplo, en la secuenciación (consulte la figura « Secuenciación fiable tras la extracción en gel»). Los fragmentos de ADN inferiores a 70 bp o superiores a 10 kb se deben extraer con el QIAEX II Gel Extraction System.

El procedimiento de QIAquick PCR Purification elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceites minerales, sales y otras impurezas de las muestras de ADN (consulte la figura « Eliminación completa de cebadores tras la PCR»). Con el uso de una microcentrifugadora o un colector de vacío, se purifica el ADN que oscila entre 100 bp y 10 kb.

Los kits QIAquick contienen un ensamblaje de membrana de sílice para la unión del ADN en tampón de alta salinidad y elución con tampón de baja salinidad o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceites minerales, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN (consulte la figura « Recuperaciones altas a partir de geles»). La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes relacionados con las resinas sueltas y los residuos pastosos. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promover la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Colorante de carga de gel

Para que el procesamiento y el análisis de las muestras sean más rápidos y prácticos, se proporciona el colorante de carga de gel. El GelPilot Loading Dye contiene tres colorantes de seguimiento (xileno cianol, azul de bromofenol y naranja G) para facilitar la optimización del tiempo de la serie del gel de agarosa y evitar que los fragmentos más pequeños de ADN migren demasiado lejos (consulte la figura  «GelPilot Loading Dye»).

El sistema QIAquick emplea un procedimiento sencillo de unión, lavado y elución (consulte el diagrama de flujo « Procedimiento de QIAquick y MinElute»). Los cortes de gel se disuelven en un tampón que contiene un indicador de pH, lo que permite determinar con facilidad el pH óptimo para la unión del ADN, la mezcla se aplica a la QIAquick Spin Column (consulte la figura « Colorante indicador de pH»). Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad generadas por el tampón. Se lavan las impurezas y el ADN puro se eluye con un volumen bajo del tampón de baja salinidad suministrado o de agua, listo para usarse en todas las aplicaciones posteriores.

Manejo

Las QIAquick Spin Columns se han diseñado con dos prácticas opciones de manejo. Las columnas de centrifugación se adaptan a una microcentrifugadora de mesa convencional o a un colector de vacío con conectores Luer, como el QIAvac 24 Plus con QIAvac Luer Adapters. El QIAquick Gel Extraction Kit, junto con otros kits basados en columna de centrifugación de QIAGEN, se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect, lo que permite incrementar la productividad y la normalización de los resultados (consulte las figuras «Opciones de manejo de la columna de centrifugación  A,  B,  C y  D» y « QIAcube Connect»).

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema QIAquick están listos para su uso directo en diversas aplicaciones, incluyendo la secuenciación, la ligación y transformación, la digestión de restricción, el marcado, la microinyección, la PCR y la transcripción in vitro.