QIAcuity Probe PCR Kit

Pour utilisation avec les instruments de PCR numérique QIAcuity

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QIAcuity Probe PCR Kit (5 ml)

N° de réf. / ID.   250102

5 × 1 ml de QIAcuity Probe Mastermix à la concentration 4x, 8 × 1,9 ml d’eau
1 293 000,00 ₩
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Volume
5 ml
1 ml
25 ml
Le QIAcuity Probe PCR Kit est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

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Caractéristiques

  • Des réactions simplex aux réactions 5-plex
  • Master Mix à la concentration 4x pour charger plus d’échantillons
  • Optimisé pour les applications microfluidiques dans les QIAcuity Nanoplates
  • Moins d’amplification par PCR non spécifique
  • Conforme à REACH

Détails produit

Le QIAcuity Probe PCR Kit contient un Master Mix à la concentration 4x, prêt à l’emploi et optimisé pour les applications microfluidiques dans les QIAcuity Nanoplates. Ce kit améliore la spécificité et l’efficacité de la PCR numérique à base de sonde pour assurer l’exactitude des analyses simplex à 5-plex. Le QIAcuity Probe Master Mix est optimisé pour augmenter la spécificité pour une quantification précise de l’ADNg ou de l’ADNc sur les instruments de dPCR QIAcuity.

Ce kit fonctionne conjointement avec le QIAcuity Digital PCR System et les QIAcuity Nanoplates.

Souhaitez-vous en savoir plus sur ce produit et être contacté par l’un de nos spécialistes de la dPCR ? Inscrivez-vous ici, et nous vous contacterons très prochainement.

Performances

Des performances supérieures
Les QIAcuity Master Mixes pour la dPCR à base de sonde d’hydrolyse font appel aux dernières versions d’ADN polymérase QIAGEN de haute qualité. La combinaison unique entre la nouvelle ADN polymérase QuantiNova et la technologie de tampon exclusive et éprouvée de QIAGEN, optimisée pour la microfluidique des nanoplaques, fournit des résultats très homogènes en termes de sensibilité, reproductibilité et efficacité.

Détection à base de sonde simplex à 5-plex grâce au QIAcuity Probe PCR Kit
Le mélange principal spécial inclus dans le QIAcuity Probe PCR Kit permet de quantifier avec exactitude jusqu’à 5 cibles présentant des abondances très différentes dans un puits de la QIAcuity Nanoplate. Cela permet d’économiser du temps et de l’argent et de réduire la quantité d’échantillon nécessaire. De plus, les données de PCR duplex ou multiplex obtenues sont comparables à celles obtenues dans une PCR simplex.

Jusqu’à 100 heures de stabilité des réactions
Les mélanges de PCR QIAcuity peuvent être stockés à 30 C pendant 100 heures sans compromettre les performances des réactions subséquentes. Cette stabilité exceptionnelle, même après un stockage prolongé à température ambiante en l’absence d’agent refroidissant, rend le QIAcuity Probe PCR Kit idéal pour la configuration de réactions et la manipulation de piles de plaques haut débit.

Principe

Le QIAcuity Probe PCR Kit permet d’effectuer des analyses simplex ou multiplex d’ADNc ou d’ADNg avec la plus grande spécificité grâce à un nouveau mécanisme hot start médié par anticorps. Aux basses températures, la QuantiNova DNA Polymerase est conservée dans un état inactif par le QuantiNova Antibody et un nouvel additif, le QuantiNova Guard qui stabilise le complexe. Cela améliore la rigueur du hot start et prévient l’élongation de dimères d’amorces et d’amorces hybridées de façon non spécifique. Dans les 2 minutes qui suivent l’augmentation de la température à 95 C, le QuantiNova Antibody et le QuantiNova Guard sont dénaturés et la QuantiNova DNA Polymerase est activée, permettant l’amplification par PCR.

Vous trouverez ici une description du principe de la réaction de dPCR sur nanoplaque.

Procédure

Comme dans les expériences de qPCR, la préparation des échantillons comprend le transfert du master mix, des sondes et des amorces sur une nanoplaque de 96 ou 24 puits, suivi de l’addition des échantillons. Le système intègre le fractionnement, le thermocyclage et l’imagerie dans un seul instrument entièrement automatisé qui permet aux utilisateurs d’obtenir des résultats en moins de 2 heures. Il est possible d’effectuer l’analyse à l’aide de la suite logicielle, qui donne la concentration de la séquence cible en copies par microlitre et permet le contrôle qualité pour les échantillons positifs ou NTC. Cette analyse peut également être effectuée sur des ordinateurs à distance au sein du même réseau local (Local Area Network, LAN).

Applications

Associé au QIAcuity Digital PCR System et aux QIAcuity Nanoplates, le QIAcuity Probe PCR Kit permet de faire l’analyse quantitative des cibles d’ADNc et d’ADNg pour une utilisation dans les applications telles que :

  • La détection des mutations rares
  • L’analyse des variations du nombre de copies
  • L’analyse de l’expression génique
  • La détection des agents pathogènes
  • Le génotypage
  • La recherche sur les miARN
  • La thérapie génique et cellulaire
  • La quantification de l’ADN résiduel 
  • La surveillance des eaux usées

Données et illustrations utiles

Ressources

Operating Software (8)
For Version 2
Version 4.0

The Volume Precision Factor (VPF) offers a unique feature to secure precision of concentration results obtained from a QIAcuity dPCR run. 
In general, Nanoplates provide partitions of fixed sizes that enable a very precise way of sample concentration calculation. Potential variation of partition sizes in Nanoplate batches, caused by different microstructure molding forms, can be addressed by applying the batch specific VPF. Furthermore, the VPF includes well-specific volume information and therefore further increases precision of concentration calculation in each well of the Nanoplates.

After downloading and updating the VPF file within the QIAcuity Software Suite, the VPF is applied automatically to the analysis of a corresponding Nanoplate batch. The VPF file includes information from all available microstructure molding forms and connected Nanoplate batches. It will be stored on the PC where the QIAcuity Software Suite is installed. 

Required QIAcuity Software Suite version: Version 1.2 or higher.

Version 2.1

QIAcuity Software Suite
SOFTWARE (389MB)

Version 1.2

The QIAcuity Software Suite 1.2 is designed to be installed on a Windows PC that is connected to one or more QIAcuity instruments. The QIAcuity Software Suite enables the user to set up plates, analyze results, and monitor the status of runs in real time. For this configuration, the QIAcuity instrument needs to be connected to a network through Ethernet. Alternatively, a direct cable connection between the QIAcuity and the notebook where the QIAcuity Software Suite is running needs to be established. When connected to a network, up to 10 users may access the QIAcuity Software Suite via a browser installed on the client PC (Windows or Mac).

The following browsers are supported in the QIAcuity Software Suite:

-Mozilla Firefox (version 64.0.2 or higher)
-Microsoft Edge (version 44.17763.1.0 or higher)
-Google Chrome (version 71.0.3578.98 or higher)

The new QIAcuity Software Suite 1.2 offers a functionality that enables users of the QIAcuity Software 1.1.3 to upgrade to the new version while keeping the library of previously stored plate runs.

Note: If you have exported plates from QIAcuity Software Suite 1.1.3 that you would like to import and use in QIAcuity Software Suite 1.2, you will need to import the plates before upgrading from version 1.1.3 to version 1.2. You may then export the plates again. Future software version starting from QIAcuity Software Suite 2.0 will facilitate import of plates from previous QIAcuity Software Suite versions.

The new improvements are as follows:

-Support for the Nanoplate 8.5k 24-well
-Hyperwell functionality to combine several wells to one combined well for analysis
-Automated plate archiving functionality
-Functionality to show the number of single/double positives in 2D scatterplots
-VPF (Volume Precision Factor) to further improve concentration calculation (see related resources)
-Additional improvements for stabilization and troubleshooting

For Version 1.2
Brochures & Guides en (1)
Fast. Scalable. Reliable.
Instrument User Manuals (2)
Application Notes (3)
The goal of this work was to compare performance of quantitative PCR (qPCR) and digital PCR (dPCR) in the quantification of gene expression and Wolbachia abundances in Nasonia parasitoid wasps.
This study tested a workflow for quantitation and qualification of AAV samples using a duplex assay on the QIAcuity dPCR instrument targeting both an insert (GFP) and the viral backbone (AAV2-ITR). With very low intra-assay and inter-assay CVs <6.5%, we demonstrate one of the main benefits of dPCR: reproducibility.
Here we provide an integrated rAAV genome titer method using the QIAcuity Digital PCR (dPCR) System with detailed parameters for high assay performance. Using this optimized method for pre-PCR handling of in-process rAAV samples, the results demonstrated that QIAcuity dPCR system generates the same level of accuracy and precision as the current gold standard ddPCR system but with much faster sample-to-result times (2 hours vs 7 hours) and higher overall throughput and scalability.
Webinars (5)
Limitations of conventional PCR and qPCR when dealing with difficult, low-volume samples and complex mixtures with high background of competitive molecules and inhibitors have posed frequent challenges for researchers and clinicians in their routine work. With the new generation of PCR technologies, digital PCR has opened doors for diverse applications, and researchers are learning to ask questions only digital PCR can answer. Join QIAGEN's webinar on how digital PCR can help take your research applications through and beyond those challenges.
This presentation will introduce dPCR, discuss its advantages, and outline how the approach might be used to improve measurement in areas like clinical diagnosis, alone or in conjunction with other methods.
In this expert webinar, Dr. Kubista will share with you the experience he and his team have gathered at the TATAA Biocenter, developing applications and providing services using digital PCR for nearly 12 years. They have experienced all the problems common to dPCR analytical workflows and developed robust standard operating procedures to minimize the risk of error and maximize robustness and repeatability, and developed various controls to test the performance and validate the methods. He will also discuss dPCR assay design and validation and then focus on strategies for copy number determination and rare mutation detection.
The QIAGEN digital PCR technology and its expanded capability will not only transform the portfolio of conventional qPCR applications but also provide a more rapid, accurate, and sensitive method for finding answers to difficult biological questions. 
As the digital PCR technology evolves and becomes more accessible and affordable, the transition from qPCR and adoption of dPCR will hopefully no longer remain a challenge. Experts share insights in an upcoming webinar about the fully integrated, rapid, and highly flexible digital PCR portfolio from QIAGEN. 
Certificates of Analysis (1)