Sensiscript RT Kit

反応あたり50 ng 未満のRNA を用いた逆転写反応

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Sensiscript RT Kit (200)

カタログ番号 / ID.   205213

For 200 reverse-transcription reactions: Sensiscript Reverse Transcriptase, 4 x 150 µl 10x Buffer RT, 4 x 100 µl dNTP Mix (contains 5 mM each dNTP), 4 x 1.1 ml RNase-free water
$1,537.00
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Sensiscript RT Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • わずか10 コピーのテンプレートも高感度で検出
  • RNA への親和性が高い酵素で高収量 cDNA
  • 追加の RNase H 分解は不要
  • 煩わしいピペッティング操作なしの迅速で簡単な方法

製品詳細

Sensiscript Reverse Transcriptase (RT) Kit は、シングルセルRT-PCR、バイオプシーやLMD サンプルの解析のような非常に微量なRNA(50 ng 未満)を用いた高感度アプリケーションに最適です。Sensiscript Reverse TranscriptaseはRNAに対する高い親和性を持つため、幅広いダイナミックレンジで効率的なRT-PCR を実現し、微量RNAでも非常に高感度なRT-PCR が可能です。Sensiscript RT Kitには、Sensiscript Reverse Transcriptase、dNTPs、至適化済みの反応バッファーが含まれています。プライマーを添加するだけで迅速かつ簡単にcDNAを合成できます。

パフォーマンス

Sensiscript Reverse Transcriptase(RT)は、幅広いダイナミックレンジにわたる高い効率と、微量のRNAに対する高い感度をもたらします(図" 1個の細胞に相当するRNAを用いたRT-PCR")。その他の逆転写酵素では、GC含有率の高いRNA領域は逆転写酵素が止まったり、RNAテンプレートから解離する原因であり、またRNAのループ構造部分をスキップしてしまいます(図 " 完全な長さのRT-PCR産物 - B")。しかし、このような逆転写が困難なテンプレートも、QIAGENの逆転写酵素を使用すれば、逆転写反応が効率よく行なわれることが証明されています(図 " 完全な長さのRT-PCR産物 - A")。Sensiscript RT Kit は、至適化を必要とせず、ほとんど問題なく逆転写反応を行なえるキットです。

Sensiscript RT Kitsのロット間の再現性は、QIAGENの厳しい品質管理により保証されています。全てのSensiscript RT Kitsに添付されている最適化されたBuffer RT、dNTP、および水は、RNaseフリーを保証されています。Sensiscript RTの各ロットは、RT-PCRの再現性についての品質管理テストを徹底的に受けています。

図参照

原理

Sensiscript Reverse Transcriptase(RT)は、シングルセルRT-PCRやバイオプシーサンプル解析など、微量のRNA(50 ng以下)を使用する高感度アプリケーションのためにデザインされ、市販された最初の酵素です。RNAに対するSensiscript RTの高い親和性とともに、低コピー転写物を使用しても高特異性かつ高感度のRT-PCRと、温度または反応条件の調節がなくても、複雑な二次構造をもつRNAでも、完全に読み取りを実現する至適化済みの反応バッファーで、dNTPと一緒にすぐに使用することができます。プライマーミックスが含まれていない点にご注意ください。

多くのウイルスRNA調製にはキャリアRNAが存在するので、Omniscript RTがウイルスRNAの逆転写反応に最適な酵素です。比較実験においても、Omniscript RTは、幅広いRNAのスタート量で他の逆転写酵素より一定した優れた性能を示します。

操作手順

至適化済みのSensiscript Reverse Transcriptase 反応バッファーを使用すれば、手間のかかるピペット操作とプレインキュベーションステップがなくなり、さらに、RNase H 分解ステップを追加する必要もなくなります(フローチャート" Sensiscript Reverse Transcriptase操作手順"参照)。
図参照

アプリケーション

Sensiscript Reverse Transcriptaseは、以下のようなアプリケーションに最適です。

  • 標準的なPCRおよびRT-PCR
  • リアルタイム定量RT-PCR
  • ディファレンシャルディスプレイRT-PCR
  • プライマーエクステンションおよび RACE 解析
  • クローニング用二本鎖cDNA合成

裏付けデータと数値

仕様

特徴仕様
applicationscDNA synthesis, RT-PCR, qRT-PCR
reactiontypeReverse transcription
enzymeactivityReverse transcription
realtimeorendpointEndpoint
mastermixNo
sampletargettypeRNA template
singleormultiplexSingle
withwithouthotstartWithout hotstart

リソース

User-Developed Protocols (1)
The protocol has been used successfully for Cy3-, Cy5-, and biotin-labeling of cDNA from <50 ng of total RNA or poly A+ mRNA.
キットハンドブック (1)
Sensiscript Reverse Transcriptase for First-strand cDNA synthesis using <50 ng RNA; Two-tube RT-PCR; One-tube RT-PCR
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
クイックスタートプロトコール (1)
Certificates of Analysis (1)