QuantiTect Primer Assays
使用SYBR® Green进行两步法和一步法定量RT-PCR，用于基因表达分析
在 GeneGlobe 配置
寻找或定制设计合适的靶标特异性检测和组合，以研究您感兴趣的生物靶标。
QuantiTect Primer Assay (200)
目录编号 / ID. 249900
For 200 x 50 µl reactions or 400 x 25 µl reactions: 10x QuantiTect Primer Assay (lyophilized) supplied in single tube
QuantiTect Primer Assays 旨在用于分子生物学应用。这些产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。
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寻找或定制设计合适的靶标特异性检测和组合，以研究您感兴趣的生物靶标。
特点
- 适用于全基因组的预制引物确保结果可靠
- PCR效率接近100%，可靠的定量检测
- 灵敏度高、特异性好
- 宽线性范围内的准确定量检测
- SYBR Green检测方法可节约时间和成本
产品详情
QuantiTect Primer Assays是生物信息学验证的全基因组引物对，可在任何PCR仪上进行基于SYBR Green的real-time RT-PCR。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物的基因。每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对，以冻干粉形式提供，经重悬可获得10倍稀释的引物溶液（real-time RT-PCR反应液组分需单独订购）。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane Kit进行SYBR Green检测，可在real-time RT-PCR中确保高特异性和灵敏度的结果，其表现与探针法检测相当。
绩效
QuantiTect Primer Assays在很大模板浓度范围内确保高效定量分析RNA转录本（参见" Reproducible real-time RT-PCR"的A部分）。应用QuantiFast SYBR Green Kit或其他QIAGEN SYBR Green试剂盒可确保精确的定量分析。该试剂盒可避免形成PCR人工产物（参见" Reproducible real-time RT-PCR"的B部分）。
配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit（用于两步或一步法RT-PCR的预混液）的分析方法与探针法分析相比，CT值可能更低（参见" Superior sensitivity in real-time RT-PCR"）。这得益于试剂盒的高PCR特异性，以及SYBR Green染料与每个PCR产物的多重结合。即使处理低丰度转录本也可进行高灵敏度的定量分析。
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原理
应用QuantiTect Primer Assays无需反复验证real-time RT-PCR引物（参见" Time savings in development of real-time RT-PCR assays"）。可用于一步和两步法定量RT-PCR。只需登陆QIAGEN GeneGlobe，选择和订购靶基因的引物对。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠、果蝇、拟南芥和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit（用于两步或一步法RT-PCR的预混液）能提供可靠的结果。
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程序
每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对，以冻干粉形式提供。在pH8.0的条件下经重悬获得10倍稀释的引物溶液，然后可加入QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane试剂盒提供的预混液，进行SYBR Green法检测。将含有引物的预混液装入PCR反应管或孔板，然后加入单个模板样本。
QuantiTect Primer Assays与表中试剂盒配合使用，可获得可靠的结果。
| 两步法qRT-PCR | 一步法qRT-PCR |
|---|---|
| QuantiFast SYBR Green PCR Kit | QuantiFast SYBR Green RT-PCR Kit |
| Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit | Rotor-Gene SYBR Green RT-PCR Kit |
| QuantiTect SYBR Green PCR Kit | QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit |
QuantiTect Primer Assays适用于检测RNA。当无法避免基因组DNA污染时，可使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit或FastLane Cell cDNA Kit制备cDNA。这两种试剂盒在合成cDNA的同时，可去除基因组DNA污染。
命名
基因的 QuantiTect Primer Assay均以数字命名区分，数字位于产品名中基因符号之后。更多详情请参照GeneGlobe FAQs。
应用
QuantiTect Primer Assays适用于利用SYBR Green检测技术、一步或两步法定量RT-PCR进行基因表达分析。非常适合于以下应用：
- 验证siRNA介导的基因沉默
- 验证微阵列结果
- 高通量筛查
辅助数据和图表
Superior sensitivity in real-time RT-PCR.
MAPK1 (a protein kinase) and IL6 (a cytokine) in human leukocyte cDNA (1 ng) were quantified in duplicate using [A] QuantiTect Primer Assays and the QuantiTect SYBR® Green PCR Kit, or [B] probe-based assays and a real-time PCR kit from Supplier AII. QuantiTect Primer Assays provided greater sensitivity than the probe-based assays, as demonstrated by the lower CT values, as well as high specificity, as indicated by the single peaks in melting curve analysis.
规格
| 特点 | 规格 |
|---|---|
| applications | Gene expression analysis |
| kitforthisapplicationontheinstrument | QuantiFast SYBR Green PCR or RT-PCR Kit, QuantiTect SYBR Green PCR or RT-PCR Kit |
| detection | SYBR Green I |
| realtimeorendpoint | Real-time |
| species | Human, mouse, rat, drosophila arabidopsis, chicken, dog |
| format | Lyophylized primer set |
资源
产品介绍与指南 (1)
试剂盒操作手册 (1)
文章 (1)
安全数据表 (1)
学术海报 (2)
基因表达分析 (2)
Certificates of Analysis (1)