RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit – RNA Extraction
从富含纤维的组织中纯化至多100 µg的总RNA
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RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (50)
目录编号 / ID. 74704
50 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), Proteinase K, RNase-free DNase I, RNase-free Reagents and Buffers
RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit 旨在用于分子生物学应用。该产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。
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特点
- 优化的实验方案，用于富含纤维的组织
- 总RNA产量高
- 获得高品质RNA，用于多种下游应用
- 使用DNase I去除基因组DNA
产品详情
RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit包含蛋白酶K和RNeasy离心柱，前者用于去除富含纤维的组织样本中大量的蛋白，后者用于纯化至多100 µg高品质RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现完全自动化。可使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定纤维组织样本，使用TissueRuptor或TissueLyser体系有效地裂解样本。处理更大的样本可使用RNeasy Fibrous Tissue Midi Kit（离心柱的结合能力为1 mg RNA）。
绩效
RNeasy Fibrous Tissue Kits适用于从纤维丰富组织中提取RNA，RNeasy Fibrous Tissue操作流程能简单有效的提取高品质总RNA（参见" High-quality RNA from fiber-rich tissues"），纯化的RNA适用于多种下游应用，包括芯片分析和real-time RT-PCR （参见 " Real-time gene expression analysis in a variety of fibrous tissues" 和" LightCycler analysis of high-quality RNA from heart"）。与其他硅胶方法相比，RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit从纤维丰富组织中提取的RNA产量更高（参见下表）。
| 大鼠组织(10 mg) | 使用RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit 得到的RNA产量* (µg) | 使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*（µg）（供应商AV） | 使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*（µg）（供应商R） | 使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*（µg）（供应商S） |
|---|---|---|---|---|
| 心脏 | 8.2 | 3.5 | <0.5 | 2.5 |
| 肌肉 | 5.3 | 0.5 | 2.0† | 2.2 |
| 皮肤 | 6.0 | 未确定 | 未确定 | 未确定 |
| 食道 | 13.9 | 未确定 | 未确定 | 未确定 |
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原理
RNeasy技术具有异硫氰酸胍裂解的严谨性以及硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA的纯化流程。RNeasy Fibrous Tissue Kits适用于处理纤维丰富的组织，例如骨骼肌、心脏和主动脉。因为含有大量的收缩性蛋白、连接组织和胶原蛋白，这些组织非常难裂解。RNeasy Fibrous Tissue操作流程将蛋白酶K和RNase-free DNase消化步骤结合起来，在RNA分离的同时能降解蛋白和基因组DNA，纯化得到的高品质总RNA的产量更高。RNeasy技术适用于大于200 nt的RNA，因此RNA产物不包括5S rRNA、tRNA或其他小分子量RNAs，产物占细胞内总RNA的15–20%。
程序
0.5–30 mg纤维组织样本在异硫氰酸胍缓冲液中裂解。裂解液被稀释后，样本经蛋白酶K处理。离心使碎片沉淀。然后加入乙醇使裂解液澄清，之后RNA结合到RNeasy硅胶膜上。在RNeasy离心柱中加入DNase去除残留的DNA。DNase和其他污染物被洗涤后，使用150–500 µl不含RNase的水即可洗脱得到至多100 µg的高品质总RNA（参见" RNeasy Fibrous Tissue Midi procedure"）。
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应用
RNeasy Fibrous Tissue Kits从纤维丰富的样本中纯化得到的高品质总RNA，适用于多种下游应用，包括芯片分析和real-time RT-PCR。
辅助数据和图表
High-quality RNA from fiber-rich tissues.
RNA was isolated from the indicated rat tissues using the RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit. RNA quality was determined by [A] formaldehyde agarose gel electrophoresis and [B] scanning with the Agilent 2100 BioAnalyzer.
规格
| 特点 | 规格 |
|---|---|
| applications | PCR, real-time PCR, microarray |
| elutionvolume | 30–100 µl |
| format | Spin column |
| timeperrunorperprep | 55 minutes |
| purificationoftotalrnamirnapolyamrnadnaorprotein | RNA |
| processing | Manual |
| sampleamount | 0.5–30 mg |
| technology | Silica technology |
| mainsampletype | Fibre-rich tissue samples |
| yield | 5–12 µg |
资源
安全数据表 (1)
产品介绍与指南 (1)
试剂盒操作手册 (1)
快速启动实验方案 (1)
基因表达分析 (1)
Certificates of Analysis (1)
文献
Myofilament response to Ca2+ and Na+/H+ exchanger activity in sex hormone-related protection of cardiac myocytes from deactivation in hypercapnic acidosis.
Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol; 2006; 292 (2):R837-43 2006 Oct 12 PMID:17038443
A study of alternative splicing in the pig.
BMC Res Notes; 2010; 3 :123 2010 May 5 PMID:20444244
Macrophage-derived matrix metalloproteinase-2 and -9 promote the progression of cerebral aneurysms in rats.
Stroke; 2006; 38 (1):162-9 2006 Nov 22 PMID:17122420
Matrix metalloproteinase and tissue inhibitor expression in atherosclerotic and nonatherosclerotic thoracic aortic aneurysms.
J Thorac Cardiovasc Surg; 2007; 133 (1):155-61 2007 Jan PMID:17198804
Use of an aggressive MCF-7 cell line variant, TMX2-28, to study cell invasion in breast cancer.
Mol Cancer Res; 2006; 4 (12):905-13 2006 Dec PMID:17189381