QIAGEN Plasmid Kits for Plasmid DNA Extraction.

10 mgまでのトランスフェクショングレードのプラスミドおよびコスミドDNA精製用

S_2406_Qtips

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QIAGEN Plasmid Mini Kit (25)

カタログ番号 / ID.   12123

25 QIAGEN-tip 20, Reagents, Buffers
€172.00
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KitBufferColumnCartridge
Plasmid Kit
Plasmid Buffer Set
QIAGEN-tip
QIAfilter Cartridge
カラムタイプ
Mini
Midi
Maxi
Mega
Giga
調製
25
100
本製品には、REACH(EC 1907/2006 Annex XIV)で規制されている物質が含まれています。EU内での本製品の使用は、適用除外(第56条(3))により許可されています。詳細については、このページの「リソース」セクションにあるREACH通知および本製品のSDSを参照してください。
QIAGEN Plasmid Mini Kit (25)は分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
プラスミドDNA抽出用QIAGEN Plasmid Kitsは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • CsCl密度勾配遠心法を2回行なって得られる純度に匹敵
  • 高収量のプラスミドDNA
  • 経済的な調製法
  • LyseBlue試薬により最適な溶解操作と最大のDNA収量

製品詳細

QIAGEN Plasmid Kits はオープンカラム方式の陰イオン交換チップを用いてトランスフェクショングレードのプラスミドDNA 精製を実現します。ライセート清澄化およびイソプロパノール沈殿は遠心操作により行ないます。

パフォーマンス

QIAGEN Plasmid Kitsでは、プラスミドDNAを効率的に精製するためのオープンカラム方式のQIAGEN陰イオン交換チップを使用しています。それぞれ、10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 µg(Maxi)、100 µg(Midi)、20 µg (Mini) までのトランスフェクショングレードの高コピー数プラスミドDNAを培養液から精製します(培養液の容量はプラスミドコピー数、挿入DNAのサイズ、宿主株、培養液に依存)。QIAGEN Plasmid Kitsで精製したプラスミドDNAは、トランスフェクション(図" プラスミド精製法とトランスフェクション効率の関係")、クローニング、in vitro 転写などのアプリケーションで使用するのに最適です。
図参照

原理

QIAGEN-tip 中の非常にユニークな陰イオン交換樹脂は核酸精製を目的として開発されました。本製品の優れた核酸分離能力により、CsCl 密度勾配遠心分離法を2回行なって得たDNAの純度に匹敵、あるいはそれ以上の純度のDNAが調製されます。充填済みQIAGEN-tipsはオープンカラムで操作し、乾燥することはなく、プラスミド調製に必要なマニュアルでの作業時間を短縮できます。全てのQIAGENプラスミド精製システムでは、ユーザーおよび環境への影響が最小限となるように、フェノール、クロロホルム、臭化エチジウム、CsCl等の有害な試薬を一切使用していません。

製品仕様

特徴
Plasmid
Giga Kit
Plasmid
Mega Kit
Plasmid
Maxi Kit
Plasmid
Midi Kit
Plasmid
Mini Kit
Applications Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing, etc. Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing, etc. Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing, etc. Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing, etc. Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing, etc.
Culture volume/starting material 2.5–5 liters culture volume 500 ml – 2.5 liters culture volume 100–500 ml culture volume 25–100 ml culture volume 3–10 ml culture volume
Elution volume Variable Variable Variable Variable Variable
Plasmid type High-copy, low-copy, cosmid DNA High-copy, low-copy, cosmid DNA High-copy, low-copy, cosmid DNA High-copy, low-copy, cosmid DNA High-copy, low-copy, cosmid DNA
Processing Manual (centrifugation) Manual (centrifugation) Manual (centrifugation) Manual (centrifugation) Manual (centrifugation)
Sample per run 1 sample per run 1 sample per run 1 sample per run 1 sample per run 1 sample per run
Technology Anion-exchange technology Anion-exchange technology Anion-exchange technology Anion-exchange technology Anion-exchange technology
Time per run 320 min 220 min  160 min 150 min 80 min
Yield <10 mg <2.5 mg <500 µg up to 100 µg <20 µg

操作手順

QIAGEN Plasmid Kitsを使用して、遠心操作でバクテリアライセートを清澄化します。清澄化したライセートを陰イオン交換チップ上にアプライすると、適切な低塩あるいはpH条件でプラスミドDNAが選択的に結合します。RNA、タンパク質、二次代謝物、その他の低分子量不純物が、中濃度の塩による洗浄で取り除かれ、高純度プラスミドDNAが高塩濃度のバッファーで溶出されます(フローチャート" QIAGEN Plasmid Kits 操作の比較"参照)。イソプロパノール沈殿によりDNAが濃縮・脱塩され、遠心操作により回収されます。

図参照

アプリケーション

QIAGEN Plasmid Kits を用いて精製したプラスミドDNAは、以下のようなアプリケーションに最適です。

  • トランスフェクション
  • クローニング
  • PCR
  • In vitro転写

Example 1 
  12123 12125 12143 12145 12145X4 12162 12163 12165
Product Plasmit Kit Plasmit Kit Plasmit Kit Plasmit Kit Plasmit Kit Plasmit Kit Plasmit Kit Plasmit Kit
Product Type Kit Kit Kit Kit Kit Kit Kit Kit
Column Type  Mini Mini MIDI MIDI MIDI MAXI MAXI MAXI
Preparations 25 100 25 100 400 10 25 100
Example 2
CatNo Product Product Type Column Type Preparations
12123 Plasmit Kit Kit Mini 25
12125 Plasmit Kit Kit Mini 100
12143 Plasmit Kit Kit MIDI 25
12145 Plasmit Kit Kit MIDI 100
12145X4 Plasmit Kit Kit MIDI 400
12162 Plasmit Kit Kit MAXI 10
12163 Plasmit Kit Kit MAXI 25
12165 Plasmit Kit Kit MAXI 100

裏付けデータと数値

仕様

特徴仕様
technologyAnion-exchange technology
culturevolumestartingmaterial3 ml–5 liters culture volume
yield<20 µg to <10 mg
processingManual (gravity flow)
samplesperrunthroughput1 sample per run
timeperrunorprepperrun80–320 min
applicationsTransfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.
plasmidtypeHigh-copy, low-copy, cosmid DNA

リソース

キットハンドブック (2)
Supplementary Protocols (8)
This protocol is designed for the rapid, easy, and non-toxic preparation of up to 2 mg genomic DNA from not more than 2 g of tissue using QIAGEN-tip 2500. QIAGEN® Genomic-tips 20/G, 100/G, and 500/G can also be used with this protocol by reducing the amount of starting material according to the table on page 2. The purified genomic DNA ranges in size from 50-150 kb.
This protocol is designed for isolation of up to 200 μg RNA from 150 mg plant tissue or up to 1 mg RNA from 600 mg plant tissue and is for use with QIAGEN-tip 100 or QIAGEN-tip 500, respectively.
This protocol is for purification of up to 100 µg endotoxin-free plasmid DNA using QIAGEN-tip 100.
This protocol is designed to provide up to 150 μg BAC/PAC/P1 DNA or up to 400 μg cosmid DNA.
Endotoxin-free DNA is essential for gene therapy research and will improve transfection into sensitive eukaryotic cells.
User-Developed Protocols (12)
The procedure has been used successfully for isolation of different medium-copy-number plasmids carrying pHM1519 or pBL1 origins of replication from Corynebacterium glutamicum ATCC 13032. Yield of plasmid DNA was typically 0.4-1.5 µg per ml LB culture, although yield was dependent on the vector, the insert, and the size of the plasmid.
The procedure has been used successfully for isolation of high- and low-copy-number plasmids from various Bacillus subtilis strains. Yield of plasmid DNA was typically 10-20 µg plasmid DNA from 100 ml culture.
The procedure has been used successfully for isolation of 110 kb P1 DNA (pAdsacBII with an 80 kb insert) from Escherichia coli strain NS3529. Yield of P1 DNA was typically 10-50 µg from 500 ml culture.
The procedure has been used successfully for isolation of a variety of medium-copy-number shuttle vectors from S. xylosus, S. carnosus, S. epidermidis, and S. aureus. Yield of plasmid DNA was typically 2-10 µg from 50 ml culture.
The procedure has been used successfully for isolation of cryptic plasmids (pLC2-based) from mesophilic Lactobacillus strains such as L. sake and L. curvatus. Yield of plasmid DNA was typically 10-20 µg plasmid DNA from 100 ml culture.
This procedure has been used successfully for isolation of 150-250 kb BAC DNA from a mouse-BAC library cloned in pBeloBAC11 from Escherichia coli strain HB101/r. The yield of BAC DNA from 100 ml culture was typically 20-40 μg.
The procedure has been used successfully for isolation of high-copy-number plasmids from Proteus vulgaris and Proteus mirabilis. Yield of plasmid DNA was typically 3-8 µg DNA per ml culture.
The procedure has been used successfully for isolation of plasmids SCP2 and SCP2* as well as the plasmids listed in Table 1 (see next page) from S. coelciolor and S. lividans strains.
The procedure has been used successfully for isolation of the large (128 kb), very-low-copynumber (1-2 copies per cell) plasmid pHCG3 and its derivatives from Oligotropha carboxidovorans. Yield of plasmid DNA was typically 3-6 µg plasmid DNA from 200 ml culture.
The procedure has been used successfully for isolation of linear plasmids from Borrelia burgdorferi sensu lato species, which include Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia afzelli, and Borrelia garinii.
The procedure has been used successfully for isolation of high-copy-number plasmids from Citrobacter freundii. Yield of plasmid DNA was typically 3-8 µg DNA per ml culture.
MSDS (2)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
クイックスタートプロトコール (3)
Certificates of Analysis (1)
Safety Data Sheets (1)

出版物

Oncocytic change in pleomorphic adenoma: molecular evidence in support of an origin in neoplastic cells.
Di Palma S; Lambros MB; Savage K; Jones C; Mackay A; Dexter T; Iravani M; Fenwick K; Ashworth A; Reis-Filho JS;
J Clin Pathol; 2006; 60 (5):492-9 2006 Feb 7 PMID:16467165
Haploinsufficiency of C2GnT-I glycosyltransferase renders T lymphoma cells resistant to cell death.
Cabrera PV; Amano M; Mitoma J; Chan J; Said J; Fukuda M; Baum LG;
Blood; 2006; 108 (7):2399-406 2006 Jun 15 PMID:16778138
RepAM of the Amycolatopsis methanolica integrative element pMEA300 belongs to a novel class of replication initiator proteins.
Te Poele EM; Kloosterman H; Hessels GI; Bolhuis H; Dijkhuizen L;
Microbiology (Reading); 2006; 152 (Pt 10):2943-2950 2006 Oct PMID:17005975
Involvement of Bcl-X(L) deamidation in E1A-mediated cisplatin sensitization of ovarian cancer cells.
Chang CY; Lin YM; Lee WP; Hsu HH; Chen EI;
Oncogene; 2006; 25 (18):2656-65 2006 Apr 27 PMID:16331250