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RNeasy MinElute Cleanup Kit (50)
カタログ番号 / ID. 74204
50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers
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RNeasy MinElute Cleanup Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- 酵素反応液から効率的なクリーンアップ
- 少量の RNA をわずか 10 μl で濃縮溶出
- 様々な方法で精製した RNA のクリーンアップ
- 15分以内で高品質な RNA
製品詳細
RNeasy MinElute Cleanup Kitは、シリカゲルメンブレンテクノロジーをベースにしたRNeasy MinElute Spin Columnを用いて、酵素反応液や他のサンプルから得られたRNAのクリーンアップと濃縮を実現します。本キットはRNAサンプルの脱塩にも使用できます。最高45 μgまでのRNAをわずか10 μlの容量で精製することができます。精製はQIAcube上で自動化できます。
パフォーマンス
RNeasy MinElute Cleanup Kitによって、不純物または酵素インヒビターを含有しない、A260/A280比が1.9～2.1の高品質なトータルRNAが得られます（図" 高品質RNA"）。1個未満の細胞に相当するRNA量（約1 pg）を濃縮できます（図" RNAの濃縮"）。大量のRNA（最高45 µg）を精製でき、高感度のアッセイでの使用に適しています（図" 信頼性の高いRNAクリーンアップ"）。ダウンストリームアプリケーションにおいて反応液量を少量に保つことができ、反応効率が増加します。高純度RNAは阻害物質を含まず、反応に使用するサンプル量を増やすことができます（図" リアルタイムRT-PCRインヒビターの効率的な除去"）。
図参照
原理
RNeasy MinElute Cleanup Kitは、酵素反応液から得られたRNA（例、ラベリング、in vitro転写）、アルコール沈殿および有機溶媒抽出抽出により精製されたRNAを精製および濃縮するようにデザインされています。また、RNAサンプルを脱塩し、シリカゲルメンブレン製法により調製されたRNA（例、PAXgene Blood RNAプレップ）を精製および濃縮することもできます。グアニジンイソチオシアネート溶解と、シリカゲルメンブレンによる精製を組み合わせたRNeasyテクノロジーにより、トータルRNA精製を簡便に行なうことができます。
操作手順
グアニジンイソチオシアネートを含む溶解バッファーとエタノールをサンプルに添加し、RNAがRNeasy MinElute membraneに選択的に結合する条件を調整します。その後、サンプルをRNeasy MinElute spin column にアプライします。RNAはシリカゲルメンブレンに結合し、夾雑物は効率的に洗い流され、最後に高品質RNAが水で溶出されます。
15 分以内に酵素反応液またはクルードなRNA プレップのクリーンアップと濃縮が同時に行なえます。アルコール沈殿によるクリーンアップと濃縮は時間がかかり、少量のサンプルでは特にRNAのロスが生じます。また塩や夾雑物を除去せずサンプル濃縮のみが可能な吸引遠心法と比較してもRNeasy MinElute調製法は迅速な方法です。RNeasy MinElute Spin Column のユニークなデザインは、マイクロアレイ解析やリアルタイムRT-PCR のようなダウンストリームアプリケーションのために、わずか10 μl でRNA を溶出しRNAの濃縮ができます。精製はQIAcube上で全自動化できます。
アプリケーション
RNeasy MinEluteテクノロジーで精製されたRNAは品質が高く、以下を含む幅広いアプリケーションに最適です。
- ノーザン、ドットおよびスロットブロット
- エンドポイントRT-PCR
- リアルタイム定量RT-PCR
- アレイ解析
- Poly A+RNA調製
裏付けデータと数値
High-quality RNA.
Total RNA was isolated from HeLa cells using an acid-phenol method plus cleanup and concentration using the RNeasy MinElute Cleanup Kit. The high quality of the RNA is shown by scanning with the Agilent 2100 Bioanalyzer.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | PCR, qPCR, real-time PCR, microarray |
| format | MinElute Spin column |
| sampleamount | 200 µl |
| elutionvolume | 10–14 µl |
| processing | Manual |
| mainsampletype | (Crude) RNA preps |
| purificationoftotalrnamirnapolyamrnadnaorprotein | RNA |
| timeperrunorperprep | <15 minutes |
| technology | Silica technology |
| yield | 45 µg |
リソース
キットハンドブック (1)
MSDS (1)
パンフレット (2)
Supplementary Protocols (2)
クイックスタートプロトコール (1)
User-Developed Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)
出版物
Silencing of stathmin induces tumor-suppressor function in breast cancer cell lines harboring mutant p53.
Oncogene; 2006; 26 (7):1003-12 2006 Aug 14 PMID:16909102
The extracellular nucleotide UTP is a potent inducer of hematopoietic stem cell migration.
Blood; 2006; 109 (2):533-42 2006 Sep 28 PMID:17008551
The lspA gene, encoding the type II signal peptidase of Rickettsia typhi: transcriptional and functional analysis.
J Bacteriol; 2006; 189 (2):336-41 2006 Nov 10 PMID:17098907
Selection and cloning of poly(rC)-binding protein 2 and Raf kinase inhibitor protein RNA activators of 2',5'-oligoadenylate synthetase from prostate cancer cells.
Nucleic Acids Res; 2006; 34 (22):6684-95 2006 Dec 1 PMID:17145707
Additional freeze hardiness in wheat acquired by exposure to -3 degreesC is associated with extensive physiological, morphological, and molecular changes.
J Exp Bot; 2006; 57 (14):3601-18 2006 Sep 12 PMID:16968883