RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit – RNA Extraction

最大100 μgまでの繊維性組織からのトータルRNA精製用

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RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (50)

カタログ番号 / ID.   74704

50 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), Proteinase K, RNase-free DNase I, RNase-free Reagents and Buffers
RNeasy Fibrous Tissue Mini Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • 線維性組織に至適化済みのプロトコール
  • 高収量のトータルRNA
  • あらゆるダウンストリームアプリケーションに対応する高品質RNA
  • DNase I処理によるゲノムDNAの除去

製品詳細

RNeasy Fibrous Tissue Mini Kitには、線維性組織サンプル中の多量なタンパク質を除去するproteinase Kと、100 µgまでの高品質RNA精製のためのRNeasy Spin Columnが含まれています。本キットはQIAcube上で自動化可能です。線維性組織サンプルはRNAlater RNA Stabilization ReagentあるいはAllprotect Tissue Reagentで簡便に安定化され、TissueRuptorあるいはTissueLyserシステムで効率的に破砕されます。より多量のサンプルにはRNeasy Fibrous Tissue Midi Kit(スピンカラム結合容量はRNA 1 mg)をご使用ください。

パフォーマンス

RNeasy Fibrous Tissue Kitは線維性組織での使用に至適化されています。RNeasy Fibrous Tissue調製法により、高品質なトータル RNAを簡単かつ効率的に精製できます(図" 線維性組織から得られた高品質RNA")。精製RNAは、アレイ解析およびリアルタイムRT-PCRなどのダウンストリームアプリケーションに適しています(図" 様々な線維組織のリアルタイム遺伝子発現解析"および" 心臓から得られた高品質RNAのLightCycler解析")。RNeasy Fibrous Tissue Mini Kitは、他のシリカベースによる精製法に比べ、線維性組織からトータルRNAをより高い収量で精製できます(表参照)。

その他のシリカベースによる精製法に比べ、RNeasy Fibrous Tissue KitはトータルRNAを最高の収量で精製できます。
ラット組織
(10 mg)
RNeasy Fibrous Tissue Mini Kitによる RNA収量* (µg)シリカキット(Supplier AV)による RNA収量*(µg) シリカキット(Supplier R)による
RNA収量*(µg)
シリカキット(Supplier S)による
RNA収量*(µg)
心臓 8.2 3.5 <0.5 2.5
筋肉 5.3 0.5 2.0 2.2
皮膚 6.0 未測定 未測定 未測定
食道 13.9 未測定 未測定 未測定
*メーカーの指示に従って表記の組織からRNAを精製した。
カラムの目詰まりにより低品質のRNA が分離され、収量は調製中のコンタミにより実際より高い値になっている。
図参照

原理

グアニジンイソチオシアネート溶解と、シリカゲルメンブレンによる迅速な精製法を組み合わせたRNeasyテクノロジーにより、トータルRNA精製を簡便に行なうことができます。RNeasy Fibrous Tissue Kit は骨格筋、心臓、大動脈のような繊維の豊富な組織からのRNA 精製のために最適化されています。これらの組織は収縮性タンパク質、結合組織およびコラーゲン量が多いために組織の溶解が困難です。RNeasy Fibrous Tissueプロトコールは、タンパク質とゲノムDNAを分解するために、RNA精製の際にproteinase K分解とカラム上でのRNase-free DNase分解ステップを組み込んでおり、高品質なトータルRNAを高い収量で得られます。RNeasy調製法ではmRNAおよび200 塩基以上のその他のRNA のみを精製するので、精製物は全細胞性RNAの15~20%を形成する5S rRNA、tRNA、その他の低分子RNAを含みません。

操作手順

0.5~30 mgの線維性組織サンプルをグアニジンイソチオシアネートバッファー中で溶解します。ライセート希釈後、サンプルをproteinase Kで処理します。デブリを遠心操作によりペレット化します。清澄化ライセートにエタノールを添加し、RNAをRNeasyシリカゲルメンブレンに結合させます。一緒に精製された可能性のある微量のDNAはRNeasy Spin Column上のDNase処理により除去されます。DNaseおよびその他の夾雑物は洗浄ステップにより除去され、最大100 µgの高品質なトータルRNAが150~500 µlのRNaseフリー水で溶出されます(図" RNeasy Fibrous Tissue Mini操作手順")。

図参照

アプリケーション

RNeasy Fibrous Tissue Kitを用いて精製した線維性サンプルから得られた高品質トータルRNAは、アレイ解析やリアルタイムRT-PCRを含むあらゆるダウンストリームアプリケーションに適しています。

裏付けデータと数値

仕様

特徴仕様
applicationsPCR, real-time PCR, microarray
elutionvolume30–100 µl
formatSpin column
timeperrunorperprep55 minutes
purificationoftotalrnamirnapolyamrnadnaorproteinRNA
processingManual
sampleamount0.5–30 mg
technologySilica technology
mainsampletypeFibre-rich tissue samples
yield5–12 µg

リソース

MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
キットハンドブック (1)
クイックスタートプロトコール (1)
Certificates of Analysis (1)
Gene Expression Analysis (1)
Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Quick-Start Protocols (1)

出版物

Myofilament response to Ca2+ and Na+/H+ exchanger activity in sex hormone-related protection of cardiac myocytes from deactivation in hypercapnic acidosis.
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Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol; 2006; 292 (2):R837-43 2006 Oct 12 PMID:17038443
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Macrophage-derived matrix metalloproteinase-2 and -9 promote the progression of cerebral aneurysms in rats.
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Matrix metalloproteinase and tissue inhibitor expression in atherosclerotic and nonatherosclerotic thoracic aortic aneurysms.
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