HotStarTaq Master Mix Kit
どのようなPCRアプリケーションでも特異性の高い増幅を実現
商業用のバルク製品、カスタマイズ製品、最適化された製品が必要ですか？ QIAGENでは、ロジスティクスやコンプライアンスなどのサポートも行っています。QIAGEN Strategic Partnerships & OEMにお問い合わせください。
HotStarTaq Master Mix Kit (250 U)
カタログ番号 / ID. 203443
3 x 0.85 ml HotStarTaq Master Mix (contains 250 units HotStarTaq DNA Polymerase, PCR Buffer with 3 mM MgCl2, and 400 µM of each dNTP)and 2 x 1.7 ml RNase-Free Water
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単位
250 U
1000 U
2500 U
HotStarTaq Master Mix Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- 至適化なしに高いPCR特異性を実現
- 反応セットアップが室温で可能
- 即使用可能なマスターミックスフォーマットでピペッティング操作が減少
製品詳細
HotStarTaq Master Mixには、HotStarTaq DNA Polymerase、至適化が最小限で済む画期的なQIAGEN PCR Buffer、およびdNTPが含まれています。マスターミックスには全ての成分が含まれているので、ピペッティングステップとコンタミのリスクが減少し、スループット数と再現性が増加します。
パフォーマンス
HotStarTaq Master Mix Kitは全てのロットで、低コピー数のターゲットを増幅する実験によりPCR特異性の厳密さや再現性をチェックするなど、広範囲の品質管理テストを受けています。HotStarTaq Master Mix Kitは他社のキットに比べて高性能で、特異性と感度の高いホットスタートPCRを実現します（図" Higher specificity with different primer–template systems異なるプライマー／テンプレートシステムにおける高特異性"、" 卓越した性能 " および表）。キットに付属の画期的なPCRバッファーは、様々なPCR条件において特異性を実現し、至適化は最小限に抑えられます（図 " 幅広い至適アニーリング温度" および" 異なったマグネシウム濃度への適応"）。
高い特異性と簡便な操作を実現するHotStarTaq Master Mix Kitは、複雑なゲノムテンプレートあるいはcDNAテンプレート（図“ RT-PCR性能へのホットスタートの影響”）、複数のプライマーペア（図“ Multiplex PCRにおける特異的な増幅”）、増幅困難なサンプルあるいは低コピーのターゲット（図“ 高感度のシングルセルPCR”）などとの使用に適しています。これはまた、遺伝子スクリーニングのような多数サンプルを増幅するプロジェクトに最適です。
| HotStarTaq DNA Polymerase | ホットスタート酵素AII社 | 抗体利用 | マニュアル | ワックスバリア | |
|---|---|---|---|---|---|
| 特異的な増幅 | ++ | + | + | +/– | +/– |
| PCR至適化の不要性 | ++ | +/– | +/– | – | – |
| 取り扱いの簡便さ | ++ | ++ | + | – | – |
HotStarTaq DNA Polymerase 詳細データ
濃度：5 units/µl
組み換え酵素：Yes
基質アナログ：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、 fluorescent-dNTP/ddNTP
エクステンション速度：72℃ で2～4 kb/min
半減期：97℃で10分、94℃で60分
増幅効率：≥105 倍
5'–>3' エキソヌクレアーゼ活性：Yes
余分なA付加：Yes
3'–>5' エキソヌクレアーゼ活性：No
ヌクレアーゼの混入：No
RNasesの混入：No
プロテアーゼの混入：No
自己プライマー活性：No
図参照
原理
HotStarTaq Master Mixは即使用可能なマスターミックスで、HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN PCR Buffer、dNTPsが入っています。Taq DNA Polymeraseを修飾したHotStarTaq DNA PolymeraseはホットスタートPCR において高い特異性を実現します。
HotStarTaq DNA Polymerase
HotStarTaq DNA Polymeraseは、常温では不活性状態でポリメラーゼ活性はありません。この特性により、PCR セットアップや最初のPCR サイクル中の低温での非特異的なプライマーのアニーリングやプライマーダイマーの形成を回避できます（図" ホットスタートPCRで最高のパフォーマンスを実現"および"異なるプライマー／テンプレートシステムにおける高特異性"）。HotStarTaq DNA Polymeraseは、95℃、15 分間のインキュベーションステップで活性化され、このステップは既存のサーマルサイクリングのプログラムに容易に導入できます。
QIAGEN PCR Buffer
QIAGEN PCR Buffer は、各PCRサイクルでアニーリングステップ中にプライマー特異的な結合の割合を非特異的な結合に対して高めることにより、各PCRサイクルの特異的な増幅を維持します（図“ プライマーのアニーリングの特異性増大”）。このバッファーはユニークな配合比のKClと (NH4)2SO4を含み、従来のPCRバッファーに比べ、幅広いアニーリング温度やMg2+濃度の範囲で厳密で特異的なプライマーアニーリングを実現します。従って、異なるアニーリング温度あるいはMg2+濃度を用いて行なうPCRの至適化は最小限ですみ、または不要なこともあります（図 " 幅広い至適アニーリング温度"および" 異なったマグネシウム濃度への適応"）。
図参照
操作手順
HotStarTaq Master Mix Kitは簡便なマスターミックスフォーマットですので、操作は容易です。HotStarTaq DNA Polymeraseは、95℃、15 分間のインキュベーションステップで活性化され、このステップは既存のサーマルサイクリングのプログラムに容易に導入できます。マスターミックスを用いて、反応セットアップを室温で迅速かつ容易に行なえます。 25 µlのHotStarTaq Master Mixを各PCRチューブにピペットでいれ、RNaseフリー水（キットに付属）で希釈したプライマーとテンプレートDNAを25 µl添加します（図" HotStarTaq操作手順"）。ピペッティングステップは最小限に抑えられ、エラーとコンタミのリスクが減少し、スループット数と再現性が増加します。キットに付属の至適化済みのプロトコールにより、PCRセットアップを迅速かつ容易に行なえます。
図参照
アプリケーション
HotStarTaq Master Mix Kitは、増幅などの高度なアプリケーションを含む様々なアプリケーションに最適です：
- 複雑なゲノムテンプレート
- 複雑なcDNAテンプレート（例；RT-PCR）
- 低コピーのターゲット（例；シングルセルPCR）
- マルチプレックスPCR
裏付けデータと数値
HotStarTaq procedure.
The HotStarTaq procedure is fast and easy for maximum convenience.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets |
| realtimeorendpoint | Endpoint |
| mastermix | Yes |
| enzymeactivity | 5'-> 3' exonuclease activity |
| sampletargettype | Genomic DNA and cDNA |
| singleormultiplex | Single |
| reactiontype | PCR amplification |
| withwithouthotstart | With hotstart |
リソース
クイックスタートプロトコール (1)
User-Developed Protocols (1)
キットハンドブック (1)
パンフレット (2)
MSDS (1)
テクニカルインフォメーション (1)
Certificates of Analysis (1)
Brochures & Guides (2)
Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Technical Information (1)
Quick-Start Protocols (1)
出版物
Rapid detection of point mutations conferring resistance to fluoroquinolone in gyrA of Helicobacter pylori by allele-specific PCR.
J Clin Microbiol; 2006; 45 (2):303-5 2006 Nov 22 PMID:17122023
Quantitative detection of DNA methylation states in minute amounts of DNA from body fluids.
Methods; 2010; 52 (3):242-7 2010 Apr 1 PMID:20362673
Quantitative PCR-based approach for rapid phage display analysis: a foundation for high throughput vascular proteomic profiling.
Physiol Genomics; 2006; 26 (3):202-8 2006 May 16 PMID:16705020
Megalin-dependent internalization of cadmium-metallothionein and cytotoxicity in cultured renal proximal tubule cells.
J Pharmacol Exp Ther; 2006; 318 (2):782-91 2006 May 11 PMID:16690719
Cytochrome P450 gene induction in rats ex vivo assessed by quantitative real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction (TaqMan).
Drug Metab Dispos; 2006; 34 (6):1063-9 2006 Mar 10 PMID:16531474