QIAcuity Probe PCR Kit

QIAcuity 디지털 PCR 기기와 함께 사용

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QIAcuity Probe PCR Kit (5 ml)

카탈로그 번호 / ID. 250102

5 x 1ml 4x 농축 QIAcuity Probe Mastermix, 8 x 1.9ml 증류수

용량

5 ml

1 ml

25 ml

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QIAcuity Probe PCR Kit은/는 분자생물학 분야에 사용하기 위한 것입니다. 이 제품은 질병의 진단, 예방, 또는 치료용이 아닙니다.

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특징

싱글플렉스 및 최대 5-plex 반응에 사용
4배 농축된 마스터 믹스로 더 많은 샘플 로딩 가능
QIAcuity Nanoplate의 미세 유체(microfluidic) 사용에 최적화
낮은 비특이적인 PCR 증폭
REACH 준수

제품 세부 정보

QIAcuity Probe PCR Kit에는 QIAcuity Nanoplate의 미세 유체(microfluidic) 사용에 최적화된 4배 농축 마스터 믹스가 바로 사용 가능한 상태로 포함되어 있습니다. 이 키트는 프로브 기반 디지털 PCR의 특이성과 효율성을 향상시켜, 정확한 싱글플렉스 또는 최대 5-plex 분석을 제공합니다. QIAcuity Probe Master Mix는 QIAcuity dPCR 기기에서 gDNA 또는 cDNA의 정확한 정량화를 위한 특이성을 높이도록 최적화되었습니다.

이 키트는 QIAcuity Digital PCR System 및 QIAcuity Nanoplate와 함께 사용할 수 있습니다.

제품에 대해 자세히 알아보고 당사의 dPCR 전문가에게 문의하시겠습니까? 여기에 정보를 기입하시면 곧 연락드리겠습니다.

성능

우수한 성능
가수 분해 프로브 기반 dPCR을 위한 QIAcuity Master Mix는 최신 버전의 QIAGEN 고품질 DNA 중합효소를 사용합니다. 새로운 QuantiNova DNA 중합효소와 나노플레이트 미세 유체(microfluidic)에 최적화된 QIAGEN의 독점적이고 입증된 완충액 기술의 고유한 조합은 민감도, 재현성 및 효율성 측면에서 매우 일관된 결과를 제공합니다.

QIAcuity Probe PCR Kit를 사용하여 싱글플렉스에서 5-plex까지 프로브 기반 검출
QIAcuity Probe PCR Kit의 특수 마스터 믹스를 사용하면 QIAcuity Nanoplate의 웰에서 서로 다양한 비율로 존재하는 최대 5개의 표적을 정확하게 정량화할 수 있습니다. 이는 시간과 비용을 절약하고 필요한 샘플 물질의 양을 줄입니다. 또한, 듀플렉스 또는 멀티플렉스 PCR 데이터는 싱글플렉스 PCR에서 얻은 데이터와 유사합니다.

최대 100시간의 반응 안정성
QIAcuity PCR 혼합물은 후속 반응의 성능을 떨어뜨리지 않고 최대 100시간 동안 30°C에서 보관할 수 있습니다. 냉각제를 사용하지 않고 실온에서 장기간 보관한 후에도 안정성이 뛰어나므로 QIAcuity Probe PCR Kit는 처리량이 많은 반응 설정 및 플레이트 적재 처리에 이상적입니다.

원리

QIAcuity Probe PCR Kit는 새로운 항체 매개 hot-start 작용기전으로 인해 싱글플렉스 또는 멀티플렉스, cDNA 또는 gDNA 분석에 높은 특이도를 제공합니다. 저온에서 QuantiNova DNA 중합효소는 QuantiNova Antibody 그리고 복합체를 안정화하는 새로운 첨가제인 QuantiNova Guard에 의해 비활성 상태로 유지됩니다. 이는 hot-start의 엄격도를 향상시키고 비특이적으로 어닐링된 프라이머 및 프라이머 다이머의 연장을 방지합니다. 95°C까지 온도를 올린 후 2분 이내에 QuantiNova Antibody와 QuantiNova Guard가 변성되고 QuantiNova DNA Polymerase가 활성화되어 PCR 증폭이 가능합니다.

나노플레이트에서의 dPCR 반응 원리는 여기에 설명되어 있습니다.

절차

qPCR 실험과 마찬가지로 샘플 준비에는 마스터 믹스, 프로브 및 프라이머를 96-well 또는 24-well 나노플레이트로 옮긴 다음 샘플을 추가하는 작업이 포함됩니다. 이 시스템은 분획, 열순환, 이미징 기능을 완전 자동화된 하나의 기기에 통합하여 사용자가 2시간 이내에 샘플에서 결과를 얻을 수 있도록 합니다. Suite 소프트웨어에서 분석을 수행할 수 있으며, 표적 서열의 마이크로리터당 복제 농도뿐만 아니라 양성 샘플이나 NTC와 같은 품질 관리도 제공됩니다. 이 분석은 또한 동일한 근거리 통신망(Local Area Network, LAN) 내의 원격 컴퓨터로 확장될 수 있습니다.

응용 분야

QIAcuity Probe PCR Kit는 QIAcuity Digital PCR System 및 QIAcuity Nanoplate와 함께 다음과 같은 용도로 사용 시 cDNA 표적 및 gDNA의 정량 분석이 가능합니다.

희귀 돌연변이 검출
복제 수 변이 분석
유전자 발현 분석
병원체 검출
유전형 분석
miRNA 연구
세포 및 유전자 치료
잔류 DNA 정량화
폐수 모니터링

지원되는 데이터 및 수치

간단하고 신속한 플레이트 기반 워크플로우

분획, 서모사이클링 및 이미징이 모두 하나의 완전히 자동화된 기기에 통합되어 2시간 이내에 결과를 제공합니다. 나노플레이트 형식은 검체 준비를 위한 프런트 엔드 자동화가 가능하여 직접 실험 시간이 더욱 단축됩니다.

리소스

For Version 2.0

For Version 2

Version 4.0

The Volume Precision Factor (VPF) offers a unique feature to secure precision of concentration results obtained from a QIAcuity dPCR run.
In general, Nanoplates provide partitions of fixed sizes that enable a very precise way of sample concentration calculation. Potential variation of partition sizes in Nanoplate batches, caused by different microstructure molding forms, can be addressed by applying the batch specific VPF. Furthermore, the VPF includes well-specific volume information and therefore further increases precision of concentration calculation in each well of the Nanoplates.

After downloading and updating the VPF file within the QIAcuity Software Suite, the VPF is applied automatically to the analysis of a corresponding Nanoplate batch. The VPF file includes information from all available microstructure molding forms and connected Nanoplate batches. It will be stored on the PC where the QIAcuity Software Suite is installed.

Required QIAcuity Software Suite version: Version 1.2 or higher.

Version 2.1

Version 1.2

The QIAcuity Software Suite 1.2 is designed to be installed on a Windows PC that is connected to one or more QIAcuity instruments. The QIAcuity Software Suite enables the user to set up plates, analyze results, and monitor the status of runs in real time. For this configuration, the QIAcuity instrument needs to be connected to a network through Ethernet. Alternatively, a direct cable connection between the QIAcuity and the notebook where the QIAcuity Software Suite is running needs to be established. When connected to a network, up to 10 users may access the QIAcuity Software Suite via a browser installed on the client PC (Windows or Mac).

The following browsers are supported in the QIAcuity Software Suite:

-Mozilla Firefox (version 64.0.2 or higher)
-Microsoft Edge (version 44.17763.1.0 or higher)
-Google Chrome (version 71.0.3578.98 or higher)

The new QIAcuity Software Suite 1.2 offers a functionality that enables users of the QIAcuity Software 1.1.3 to upgrade to the new version while keeping the library of previously stored plate runs.

Note: If you have exported plates from QIAcuity Software Suite 1.1.3 that you would like to import and use in QIAcuity Software Suite 1.2, you will need to import the plates before upgrading from version 1.1.3 to version 1.2. You may then export the plates again. Future software version starting from QIAcuity Software Suite 2.0 will facilitate import of plates from previous QIAcuity Software Suite versions.

The new improvements are as follows:

-Support for the Nanoplate 8.5k 24-well
-Hyperwell functionality to combine several wells to one combined well for analysis
-Automated plate archiving functionality
-Functionality to show the number of single/double positives in 2D scatterplots
-VPF (Volume Precision Factor) to further improve concentration calculation (see related resources)
-Additional improvements for stabilization and troubleshooting

For Version 1.2

For Version 1.0

Fast. Scalable. Reliable.

For use with QIAcuity systems

July 2021

The goal of this work was to compare performance of quantitative PCR (qPCR) and digital PCR (dPCR) in the quantification of gene expression and Wolbachia abundances in Nasonia parasitoid wasps.

This study tested a workflow for quantitation and qualification of AAV samples using a duplex assay on the QIAcuity dPCR instrument targeting both an insert (GFP) and the viral backbone (AAV2-ITR). With very low intra-assay and inter-assay CVs <6.5%, we demonstrate one of the main benefits of dPCR: reproducibility.

Here we provide an integrated rAAV genome titer method using the QIAcuity Digital PCR (dPCR) System with detailed parameters for high assay performance. Using this optimized method for pre-PCR handling of in-process rAAV samples, the results demonstrated that QIAcuity dPCR system generates the same level of accuracy and precision as the current gold standard ddPCR system but with much faster sample-to-result times (2 hours vs 7 hours) and higher overall throughput and scalability.

Limitations of conventional PCR and qPCR when dealing with difficult, low-volume samples and complex mixtures with high background of competitive molecules and inhibitors have posed frequent challenges for researchers and clinicians in their routine work. With the new generation of PCR technologies, digital PCR has opened doors for diverse applications, and researchers are learning to ask questions only digital PCR can answer. Join QIAGEN's webinar on how digital PCR can help take your research applications through and beyond those challenges.

This presentation will introduce dPCR, discuss its advantages, and outline how the approach might be used to improve measurement in areas like clinical diagnosis, alone or in conjunction with other methods.

In this expert webinar, Dr. Kubista will share with you the experience he and his team have gathered at the TATAA Biocenter, developing applications and providing services using digital PCR for nearly 12 years. They have experienced all the problems common to dPCR analytical workflows and developed robust standard operating procedures to minimize the risk of error and maximize robustness and repeatability, and developed various controls to test the performance and validate the methods. He will also discuss dPCR assay design and validation and then focus on strategies for copy number determination and rare mutation detection.

The QIAGEN digital PCR technology and its expanded capability will not only transform the portfolio of conventional qPCR applications but also provide a more rapid, accurate, and sensitive method for finding answers to difficult biological questions.

As the digital PCR technology evolves and becomes more accessible and affordable, the transition from qPCR and adoption of dPCR will hopefully no longer remain a challenge. Experts share insights in an upcoming webinar about the fully integrated, rapid, and highly flexible digital PCR portfolio from QIAGEN.

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