MinElute Gel Extraction Kit

• Volúmenes de elución muy bajos
• Procedimiento rápido y manejo sencillo
• Recuperaciones altas y reproducibles
• Colorante de carga de gel para el análisis práctico de muestras

El MinElute Gel Extraction Kit incluye columnas de centrifugación, tampones y tubos de recogida para la purificación basada en membrana de gel de sílice de fragmentos de ADN de 70 bp–4 kb a partir de cortes de gel de hasta 400 mg. Las columnas de centrifugación se han diseñado para permitir la elución en volúmenes muy bajos (tan solo 10 µl), lo que genera altos rendimientos de ADN altamente concentrado. El indicador de pH integrado permite la fácil determinación del pH óptimo para la unión del ADN en la columna de centrifugación. Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluyendo la secuenciación, el análisis de micromatrices, la ligación y transformación, la digestión de restricción, el marcado, la microinyección, la PCR y la transcripción in vitro. El MinElute Gel Extraction Kit se puede automatizar en el instrumento QIAcube Connect.

Para obtener resultados óptimos, se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

El MinElute Gel Extraction Kit elimina nucleótidos, enzimas, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN, lo que proporciona ADN altamente concentrado adecuado para una variedad de aplicaciones posteriores (consulte la figura « Concentraciones más altas de ADN»).

El MinElute Gel Extraction Kit incluye columnas de centrifugación para la extracción en gel. Con el uso de una microcentrifugadora o un colector de vacío, el ADN de alta concentración de 70 bp–4 kb se purifica con rapidez. (Los fragmentos de ADN de 4 kb–10 kb se deben purificar con el QIAquick Gel Extraction Kit y los fragmentos de ADN menores que 70 bp o mayores que 10 kb se deben extraer con el QIAEX II Gel Extraction System.)

Los kits MinElute contienen un ensamblaje de membrana de síllice para la unión de ADN en tampón de alta salinidad y elución con tampón de baja salinidad o agua. La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes relacionados con las resinas sueltas y los residuos pastosos. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promover la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Colorante de carga de gel

Para que el procesamiento y el análisis de las muestras sean más rápidos y prácticos, se proporciona el colorante de carga de gel. El GelPilot Loading Dye contiene tres colorantes de seguimiento (xileno cianol, azul de bromofenol y naranja G) para facilitar la optimización del tiempo de la serie del gel de agarosa y evitar que los fragmentos más pequeños de ADN migren demasiado lejos (consulte la figura « GelPilot Loading Dye »).

El sistema MinElute utiliza un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución (consulte el diagrama de flujo « Procedimiento de MinElute»). Los cortes de gel se disuelven en un tampón que contiene un indicador de pH y esto permite determinar fácilmente el pH óptimo para la unión del ADN (consulte la figura « Colorante indicador de pH»), y la mezcla se aplica a la MinElute Spin Column. Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana del gel de sílice en las condiciones de alta salinidad generadas por el tampón. Las impurezas se lavan y el ADN puro se eluye con un volumen pequeño de tampón suministrado de baja salinidad o agua, listo para usarse en aplicaciones posteriores.

Manejo

Las MinElute Spin Columns se han diseñado con dos prácticas opciones de manejo. Las columnas de centrifugación se adaptan a una microcentrifugadora de mesa convencional o a un colector de vacío con conectores Luer, como el QIAvac 24 Plus con QIAvac Luer Adapters. El MinElute Gel Extraction Kit, además de otros kits de columna de centrifugación de QIAGEN, se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect para así incrementar la productividad y la normalización de los resultados (consulte las figuras «Opciones de manejo de la columna de centrifugación  A,  B,  C,  D y  QIAcube Connect»).

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute o QIAquick están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluyendo las indicadas a continuación:

• Secuenciación, incluida la secuenciación de nueva generación
• Análisis de micromatrices
• Ligación y transformación
• Digestión de restricción
• Marcado