QIAcuity EG PCR Kit

Pour utilisation avec les instruments de PCR digitale QIAcuity

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QIAcuity EG PCR Kit (1 ml)

N° de réf. / ID.   250111

1 ml de QIAcuity EvaGreen Mastermix à la concentration 3x, 2 × 1,9 ml d’eau
167,00 €
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Volume
1 ml
5 ml
25 ml
Le QIAcuity EG PCR Kit est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

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Caractéristiques

  • Pour les réactions de PCR digitale à base de colorants comprenant EvaGreen
  • Mélange principal à la concentration 3x pour charger plus d’échantillons
  • Optimisé pour les applications microfluidiques dans les QIAcuity Nanoplates
  • Conforme à REACH

Détails produit

Le QIAcuity EG PCR Kit contient un mélange principal à la concentration 3x, prêt à l’emploi et optimisé pour les applications microfluidiques dans les QIAcuity Nanoplates. Ce kit améliore la spécificité et l’efficacité de la PCR digitale à base de colorants pour assurer une analyse quantitative exacte. Un colorant intercalant EvaGreen se fixe sur l’ADN double brin et augmente l’exactitude quantitative des mesures d’ADNg ou d’ADNc sur les instruments de dPCR QIAcuity.

Ce kit fonctionne en conjonction avec le QIAcuity Digital PCR System et les QIAcuity Nanoplates.

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Performances

Des performances supérieures
Les mélanges principaux QIAcuity pour la détection avec EvaGreen font appel aux dernières versions d’ADN polymérase QIAGEN de haute qualité. La combinaison unique entre la nouvelle ADN polymérase QuantiNova et la technologie de tampon exclusive et éprouvée de QIAGEN, optimisée pour la microfluidique des nanoplaques, fournit des résultats très homogènes en termes de sensibilité, reproductibilité et efficacité.

Détection à base de colorants avec EvaGreen
Le mélange principal spécial du QIAcuity EG PCR Kit permet d’amplifier et de quantifier avec exactitude l’ADN double brin cible. Il comprend un colorant de référence optimisé qui est nécessaire à l’analyse par dPCR et au dénombrement des partitions analysables dans les nanoplaques. De plus, EvaGreen donne un signal de fluorescence plus élevé que SYBR Green aux mêmes concentrations et assure une efficacité, une spécificité et une sensibilité d’amplification maximales dans la dPCR.

Jusqu’à 100 heures de stabilité des réactions
Les mélanges de PCR QIAcuity peuvent être stockés à 30 °C pendant 100 heures sans compromettre les performances des réactions subséquentes. Cette stabilité exceptionnelle, même après un stockage prolongé à température ambiante en l’absence d’agent refroidissant, rend le QIAcuity EG PCR Kit idéal pour la configuration de réactions et la manipulation de piles de plaques haut débit.

Principe

Le QIAcuity EG PCR Kit permet d’effectuer des analyses d’ADNc ou d’ADNg avec la plus grande spécificité grâce à un nouveau mécanisme hot start médié par anticorps. Aux basses températures, l’ADN polymérase QuantiNova DNA est conservée dans un état inactif par l’anticorps QuantiNova et un nouvel additif, le protecteur QuantiNova qui stabilise le complexe. Cela améliore la rigueur du hot start et prévient l’élongation de dimères d’amorces et d’amorces hybridées de façon non spécifique. Dans les 2 minutes qui suivent l’augmentation de la température à 95 °C, l’anticorps QuantiNova et le protecteur QuantiNova sont dénaturés et l’ADN polymérase QuantiNova est activée, permettant l’amplification par PCR.

Vous trouverez ici une description du principe de la réaction de dPCR sur nanoplaque.

Procédure

Comme dans les expériences de qPCR, la préparation des échantillons comprend le transfert du mélange principal, des sondes et des amorces sur une nanoplaque de 96 ou 24 puits, suivi de l’addition des échantillons. Le système intègre le partitionnement, le thermocyclage et l’imagerie dans un seul instrument entièrement automatisé qui permet aux utilisateurs de passer de l’échantillon aux résultats en moins de 2 heures. Il est possible d’effectuer l’analyse à l’aide de la suite logicielle, qui donne la concentration de la séquence cible en copies par microlitre et permet le contrôle qualité pour les échantillons positifs ou NTC. Cette analyse peut également être effectuée sur des ordinateurs distants au sein du même réseau local (Local Area Network, LAN).

Applications

Associé avec le QIAcuity Digital PCR System et les QIAcuity Nanoplates, le QIAcuity EG PCR Kit permet d’analyser quantitativement les cibles d’ADNc et l’ADNg pour une utilisation dans les applications telles que :

  • La détection des mutations rares
  • L’analyse des variations du nombre de copies
  • L’analyse de l’expression génique
  • La détection des agents pathogènes
  • Le génotypage
  • La recherche sur les miARN

Données et illustrations utiles

Ressources

Operating Software (8)
For Version 2
Version 4.0

The Volume Precision Factor (VPF) offers a unique feature to secure precision of concentration results obtained from a QIAcuity dPCR run. 
In general, Nanoplates provide partitions of fixed sizes that enable a very precise way of sample concentration calculation. Potential variation of partition sizes in Nanoplate batches, caused by different microstructure molding forms, can be addressed by applying the batch specific VPF. Furthermore, the VPF includes well-specific volume information and therefore further increases precision of concentration calculation in each well of the Nanoplates.

After downloading and updating the VPF file within the QIAcuity Software Suite, the VPF is applied automatically to the analysis of a corresponding Nanoplate batch. The VPF file includes information from all available microstructure molding forms and connected Nanoplate batches. It will be stored on the PC where the QIAcuity Software Suite is installed. 

Required QIAcuity Software Suite version: Version 1.2 or higher.

Version 2.1

QIAcuity Software Suite
SOFTWARE (389MB)

Version 1.2

The QIAcuity Software Suite 1.2 is designed to be installed on a Windows PC that is connected to one or more QIAcuity instruments. The QIAcuity Software Suite enables the user to set up plates, analyze results, and monitor the status of runs in real time. For this configuration, the QIAcuity instrument needs to be connected to a network through Ethernet. Alternatively, a direct cable connection between the QIAcuity and the notebook where the QIAcuity Software Suite is running needs to be established. When connected to a network, up to 10 users may access the QIAcuity Software Suite via a browser installed on the client PC (Windows or Mac).

The following browsers are supported in the QIAcuity Software Suite:

-Mozilla Firefox (version 64.0.2 or higher)
-Microsoft Edge (version 44.17763.1.0 or higher)
-Google Chrome (version 71.0.3578.98 or higher)

The new QIAcuity Software Suite 1.2 offers a functionality that enables users of the QIAcuity Software 1.1.3 to upgrade to the new version while keeping the library of previously stored plate runs.

Note: If you have exported plates from QIAcuity Software Suite 1.1.3 that you would like to import and use in QIAcuity Software Suite 1.2, you will need to import the plates before upgrading from version 1.1.3 to version 1.2. You may then export the plates again. Future software version starting from QIAcuity Software Suite 2.0 will facilitate import of plates from previous QIAcuity Software Suite versions.

The new improvements are as follows:

-Support for the Nanoplate 8.5k 24-well
-Hyperwell functionality to combine several wells to one combined well for analysis
-Automated plate archiving functionality
-Functionality to show the number of single/double positives in 2D scatterplots
-VPF (Volume Precision Factor) to further improve concentration calculation (see related resources)
-Additional improvements for stabilization and troubleshooting

For Version 1.2
Brochures & Guides en (1)
Fast. Scalable. Reliable.
Instrument User Manuals (2)
Webinars (5)
Limitations of conventional PCR and qPCR when dealing with difficult, low-volume samples and complex mixtures with high background of competitive molecules and inhibitors have posed frequent challenges for researchers and clinicians in their routine work. With the new generation of PCR technologies, digital PCR has opened doors for diverse applications, and researchers are learning to ask questions only digital PCR can answer. Join QIAGEN's webinar on how digital PCR can help take your research applications through and beyond those challenges.
This presentation will introduce dPCR, discuss its advantages, and outline how the approach might be used to improve measurement in areas like clinical diagnosis, alone or in conjunction with other methods.
In this expert webinar, Dr. Kubista will share with you the experience he and his team have gathered at the TATAA Biocenter, developing applications and providing services using digital PCR for nearly 12 years. They have experienced all the problems common to dPCR analytical workflows and developed robust standard operating procedures to minimize the risk of error and maximize robustness and repeatability, and developed various controls to test the performance and validate the methods. He will also discuss dPCR assay design and validation and then focus on strategies for copy number determination and rare mutation detection.
The QIAGEN digital PCR technology and its expanded capability will not only transform the portfolio of conventional qPCR applications but also provide a more rapid, accurate, and sensitive method for finding answers to difficult biological questions. 
As the digital PCR technology evolves and becomes more accessible and affordable, the transition from qPCR and adoption of dPCR will hopefully no longer remain a challenge. Experts share insights in an upcoming webinar about the fully integrated, rapid, and highly flexible digital PCR portfolio from QIAGEN. 
Kit Handbooks (1)
For highly sensitive detection of miRNA using EvaGreen
Certificates of Analysis (1)