QIAcuity Probe PCR Kit

Zur Verwendung mit den QIAcuity digitalen PCR-Geräten

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QIAcuity Probe PCR Kit (5 ml)

Kat.-Nr. / ID.   250102

5 x 1 ml 4-fach konzentrierter QIAcuity Probe Mastermix, 8 x 1,9 ml Wasser
1.293.000,00 ₩
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Volumen
5 ml
1 ml
25 ml
QIAcuity Probe PCR Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.

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Eigenschaften

  • Für Einzelplex- und bis zu 5-plex-Reaktionen
  • 4-fach konzentrierter Master-Mix zum Laden von mehr Proben
  • Optimiert für den mikrofluidischen Einsatz mit QIAcuity Nanoplates
  • Weniger unspezifische PCR-Amplifikation
  • REACH-Konformität

Angaben zum Produkt

Das QIAcuity Probe PCR Kit enthält einen 4-fach konzentrierten, gebrauchsfertigen Master-Mix, der für den mikrofluidischen Einsatz in den QIAcuity Nanoplates optimiert ist. Das Kit steigert die Spezifität und Effizienz der sondenbasierten digitalen PCR und ermöglicht eine genaue Einzelplex- oder bis zu 5-plex-Analyse. Der QIAcuity Probe Master Mix wurde optimiert, um die Spezifität zu steigern und so eine genaue Quantifizierung von gDNA oder cDNA auf den QIAcuity dPCR-Geräten zu ermöglichen.

Das Kit wird zusammen mit dem QIAcuity Digital PCR System und den QIAcuity Nanoplates eingesetzt.

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Leistung

Überlegene Leistung
Die QIAcuity Master-Mixe für die Hydrolysesonden-basierte dPCR nutzen die neuesten Versionen der hochwertigen DNA-Polymerase von QIAGEN. Die einzigartige Kombination von QIAGENs proprietärer und bewährter Puffertechnologie, die für die Nanoplatten-Mikrofluidik optimiert wurde, mit der neuen QuantiNova DNA Polymerase liefert äußerst beständige Ergebnisse hinsichtlich der Sensitivität, Reproduzierbarkeit und Effizienz.

Sondenbasierter Nachweis von Einzel- bis 5-plex mit dem QIAcuity Probe PCR Kit
Der spezielle Master-Mix im QIAcuity Probe PCR Kit ermöglicht die genaue Quantifizierung von bis zu 5 Zielen mit sehr unterschiedlicher Abundanz in einem Well der QIAcuity Nanoplate. Das spart Zeit und Geld und reduziert die Menge des benötigten Probenmaterials. Darüber hinaus sind die mit der Duplex- oder Multiplex-PCR gewonnenen Daten vergleichbar mit denen einer Einzelplex-PCR.

Reaktionsstabilität von bis zu 100 Stunden
Die QIAcuity PCR-Mixe können bis zu 100 Stunden bei 30 °C gelagert werden, ohne dass dies die Leistung der nachfolgenden Reaktionen beeinträchtigt. Die auch nach längerer Lagerung ohne Kühlmittel bei Raumtemperatur gegebene hervorragende Stabilität ermöglicht den Einsatz des QIAcuity Probe PCR Kit für die Arbeit mit Hochdurchsatzreaktionen und Plattenstapeln.

Prinzip

Durch seinen neuartigen, Antikörper-vermittelten Hot-Start-Mechanismus bietet das QIAcuity Probe PCR Kit Einzel- oder Multiplex-cDNA- und -gDNA-Analysen höchster Spezifität. Bei niedrigen Temperaturen wird die QuantiNova DNA Polymerase durch QuantiNova Antibody und QuantiNova Guard, ein neuartiges, den Komplex stabilisierendes Additiv, in einem inaktiven Zustand gehalten. Dies verbessert die Stringenz des Hot-Starts und verhindert die Extension von unspezifisch hybridisierten Primern und Primer-Dimeren. Innerhalb von 2 Minuten nach Temperaturerhöhung auf 95 °C werden QuantiNova Antibody und QuantiNova Guard denaturiert und die QuantiNova DNA Polymerase wird aktiviert, was die PCR-Amplifikation ermöglicht.

Das Prinzip der dPCR-Reaktion in den Nanoplatten finden Sie hier beschrieben.

Verfahren

Genau wie bei qPCR-Experimenten umfasst die Probenvorbereitung die Überführung von Master-Mix, Sonden und Primern in eine 96- oder 24-Well-Nanoplatte, gefolgt von der Zugabe der Proben. Das System integriert Partitionierung, Thermocycling und Bildgebung in nur einem vollautomatischen Gerät, mit dem Sie in weniger als 2 Stunden von der Probe zum Ergebnis gelangen. Mit der Software Suite lassen sich Auswertungen durchführen, die die Konzentration der Zielsequenz in Kopien pro Mikroliter sowie Qualitätskontrollen wie positive Proben und NTC liefern. Diese Auswertung kann auch auf Remote-Computer innerhalb desselben lokalen Netzwerks (LAN) ausgedehnt werden.

Anwendungen

In Kombination mit dem QIAcuity Digital PCR System und den QIAcuity Nanoplates ermöglicht das QIAcuity Probe PCR Kit die quantitative Analyse von cDNA-Zielen und gDNA für den Einsatz in Anwendungen wie:

  • Nachweis seltener Mutationen
  • Analyse von Kopienzahlvariationen
  • Genexpressionsanalyse
  • Pathogennachweis
  • Genotypisierung
  • miRNA-Forschung
  • Zell- und Gentherapie
  • Quantifizierung von Rest-DNA 
  • Abwasserüberwachung

Ergänzende Daten und Abbildungen

Ressourcen

Operating Software (8)
For Version 2
Version 4.0

The Volume Precision Factor (VPF) offers a unique feature to secure precision of concentration results obtained from a QIAcuity dPCR run. 
In general, Nanoplates provide partitions of fixed sizes that enable a very precise way of sample concentration calculation. Potential variation of partition sizes in Nanoplate batches, caused by different microstructure molding forms, can be addressed by applying the batch specific VPF. Furthermore, the VPF includes well-specific volume information and therefore further increases precision of concentration calculation in each well of the Nanoplates.

After downloading and updating the VPF file within the QIAcuity Software Suite, the VPF is applied automatically to the analysis of a corresponding Nanoplate batch. The VPF file includes information from all available microstructure molding forms and connected Nanoplate batches. It will be stored on the PC where the QIAcuity Software Suite is installed. 

Required QIAcuity Software Suite version: Version 1.2 or higher.

Version 2.1

QIAcuity Software Suite
SOFTWARE (389MB)

Version 1.2

The QIAcuity Software Suite 1.2 is designed to be installed on a Windows PC that is connected to one or more QIAcuity instruments. The QIAcuity Software Suite enables the user to set up plates, analyze results, and monitor the status of runs in real time. For this configuration, the QIAcuity instrument needs to be connected to a network through Ethernet. Alternatively, a direct cable connection between the QIAcuity and the notebook where the QIAcuity Software Suite is running needs to be established. When connected to a network, up to 10 users may access the QIAcuity Software Suite via a browser installed on the client PC (Windows or Mac).

The following browsers are supported in the QIAcuity Software Suite:

-Mozilla Firefox (version 64.0.2 or higher)
-Microsoft Edge (version 44.17763.1.0 or higher)
-Google Chrome (version 71.0.3578.98 or higher)

The new QIAcuity Software Suite 1.2 offers a functionality that enables users of the QIAcuity Software 1.1.3 to upgrade to the new version while keeping the library of previously stored plate runs.

Note: If you have exported plates from QIAcuity Software Suite 1.1.3 that you would like to import and use in QIAcuity Software Suite 1.2, you will need to import the plates before upgrading from version 1.1.3 to version 1.2. You may then export the plates again. Future software version starting from QIAcuity Software Suite 2.0 will facilitate import of plates from previous QIAcuity Software Suite versions.

The new improvements are as follows:

-Support for the Nanoplate 8.5k 24-well
-Hyperwell functionality to combine several wells to one combined well for analysis
-Automated plate archiving functionality
-Functionality to show the number of single/double positives in 2D scatterplots
-VPF (Volume Precision Factor) to further improve concentration calculation (see related resources)
-Additional improvements for stabilization and troubleshooting

For Version 1.2
Brochures and Guides DE (1)
Fast. Scalable. Reliable.
Instrument User Manuals (2)
Application Notes (3)
The goal of this work was to compare performance of quantitative PCR (qPCR) and digital PCR (dPCR) in the quantification of gene expression and Wolbachia abundances in Nasonia parasitoid wasps.
This study tested a workflow for quantitation and qualification of AAV samples using a duplex assay on the QIAcuity dPCR instrument targeting both an insert (GFP) and the viral backbone (AAV2-ITR). With very low intra-assay and inter-assay CVs <6.5%, we demonstrate one of the main benefits of dPCR: reproducibility.
Here we provide an integrated rAAV genome titer method using the QIAcuity Digital PCR (dPCR) System with detailed parameters for high assay performance. Using this optimized method for pre-PCR handling of in-process rAAV samples, the results demonstrated that QIAcuity dPCR system generates the same level of accuracy and precision as the current gold standard ddPCR system but with much faster sample-to-result times (2 hours vs 7 hours) and higher overall throughput and scalability.
Webinars (5)
Limitations of conventional PCR and qPCR when dealing with difficult, low-volume samples and complex mixtures with high background of competitive molecules and inhibitors have posed frequent challenges for researchers and clinicians in their routine work. With the new generation of PCR technologies, digital PCR has opened doors for diverse applications, and researchers are learning to ask questions only digital PCR can answer. Join QIAGEN's webinar on how digital PCR can help take your research applications through and beyond those challenges.
This presentation will introduce dPCR, discuss its advantages, and outline how the approach might be used to improve measurement in areas like clinical diagnosis, alone or in conjunction with other methods.
In this expert webinar, Dr. Kubista will share with you the experience he and his team have gathered at the TATAA Biocenter, developing applications and providing services using digital PCR for nearly 12 years. They have experienced all the problems common to dPCR analytical workflows and developed robust standard operating procedures to minimize the risk of error and maximize robustness and repeatability, and developed various controls to test the performance and validate the methods. He will also discuss dPCR assay design and validation and then focus on strategies for copy number determination and rare mutation detection.
The QIAGEN digital PCR technology and its expanded capability will not only transform the portfolio of conventional qPCR applications but also provide a more rapid, accurate, and sensitive method for finding answers to difficult biological questions. 
As the digital PCR technology evolves and becomes more accessible and affordable, the transition from qPCR and adoption of dPCR will hopefully no longer remain a challenge. Experts share insights in an upcoming webinar about the fully integrated, rapid, and highly flexible digital PCR portfolio from QIAGEN. 
Certificates of Analysis (1)