HotStarTaq Master Mix Kit
どのようなPCRアプリケーションでも特異性の高い増幅を実現
商業用のバルク製品、カスタマイズ製品、最適化された製品が必要ですか？ QIAGENでは、ロジスティクスやコンプライアンスなどのサポートも行っています。QIAGEN Strategic Partnerships & OEMにお問い合わせください。
HotStarTaq Master Mix Kit (250 U)
カタログ番号 / ID. 203443
3 x 0.85 ml HotStarTaq Master Mix (contains 250 units HotStarTaq DNA Polymerase, PCR Buffer with 3 mM MgCl2, and 400 µM of each dNTP)and 2 x 1.7 ml RNase-Free Water
単位
250 U
1000 U
2500 U
HotStarTaq Master Mix Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
商業用のバルク製品、カスタマイズ製品、最適化された製品が必要ですか？ QIAGENでは、ロジスティクスやコンプライアンスなどのサポートも行っています。QIAGEN Strategic Partnerships & OEMにお問い合わせください。
特徴
- 至適化なしに高いPCR特異性を実現
- 反応セットアップが室温で可能
- 即使用可能なマスターミックスフォーマットでピペッティング操作が減少
製品詳細
HotStarTaq Master Mixには、HotStarTaq DNA Polymerase、至適化が最小限で済む画期的なQIAGEN PCR Buffer、およびdNTPが含まれています。マスターミックスには全ての成分が含まれているので、ピペッティングステップとコンタミのリスクが減少し、スループット数と再現性が増加します。
パフォーマンス
HotStarTaq Master Mix Kitは全てのロットで、低コピー数のターゲットを増幅する実験によりPCR特異性の厳密さや再現性をチェックするなど、広範囲の品質管理テストを受けています。HotStarTaq Master Mix Kitは他社のキットに比べて高性能で、特異性と感度の高いホットスタートPCRを実現します（図" Higher specificity with different primer–template systems異なるプライマー／テンプレートシステムにおける高特異性"、" 卓越した性能 " および表）。キットに付属の画期的なPCRバッファーは、様々なPCR条件において特異性を実現し、至適化は最小限に抑えられます（図 " 幅広い至適アニーリング温度" および" 異なったマグネシウム濃度への適応"）。
高い特異性と簡便な操作を実現するHotStarTaq Master Mix Kitは、複雑なゲノムテンプレートあるいはcDNAテンプレート（図“ RT-PCR性能へのホットスタートの影響”）、複数のプライマーペア（図“ Multiplex PCRにおける特異的な増幅”）、増幅困難なサンプルあるいは低コピーのターゲット（図“ 高感度のシングルセルPCR”）などとの使用に適しています。これはまた、遺伝子スクリーニングのような多数サンプルを増幅するプロジェクトに最適です。
| HotStarTaq DNA Polymerase | ホットスタート酵素AII社 | 抗体利用 | マニュアル | ワックスバリア | |
|---|---|---|---|---|---|
| 特異的な増幅 | ++ | + | + | +/– | +/– |
| PCR至適化の不要性 | ++ | +/– | +/– | – | – |
| 取り扱いの簡便さ | ++ | ++ | + | – | – |
HotStarTaq DNA Polymerase 詳細データ
濃度：5 units/µl
組み換え酵素：Yes
基質アナログ：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、 fluorescent-dNTP/ddNTP
エクステンション速度：72℃ で2～4 kb/min
半減期：97℃で10分、94℃で60分
増幅効率：≥105 倍
5'–>3' エキソヌクレアーゼ活性：Yes
余分なA付加：Yes
3'–>5' エキソヌクレアーゼ活性：No
ヌクレアーゼの混入：No
RNasesの混入：No
プロテアーゼの混入：No
自己プライマー活性：No
図参照
原理
HotStarTaq Master Mixは即使用可能なマスターミックスで、HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN PCR Buffer、dNTPsが入っています。Taq DNA Polymeraseを修飾したHotStarTaq DNA PolymeraseはホットスタートPCR において高い特異性を実現します。
HotStarTaq DNA Polymerase
HotStarTaq DNA Polymeraseは、常温では不活性状態でポリメラーゼ活性はありません。この特性により、PCR セットアップや最初のPCR サイクル中の低温での非特異的なプライマーのアニーリングやプライマーダイマーの形成を回避できます（図" ホットスタートPCRで最高のパフォーマンスを実現"および"異なるプライマー／テンプレートシステムにおける高特異性"）。HotStarTaq DNA Polymeraseは、95℃、15 分間のインキュベーションステップで活性化され、このステップは既存のサーマルサイクリングのプログラムに容易に導入できます。
QIAGEN PCR Buffer
QIAGEN PCR Buffer は、各PCRサイクルでアニーリングステップ中にプライマー特異的な結合の割合を非特異的な結合に対して高めることにより、各PCRサイクルの特異的な増幅を維持します（図“ プライマーのアニーリングの特異性増大”）。このバッファーはユニークな配合比のKClと (NH4)2SO4を含み、従来のPCRバッファーに比べ、幅広いアニーリング温度やMg2+濃度の範囲で厳密で特異的なプライマーアニーリングを実現します。従って、異なるアニーリング温度あるいはMg2+濃度を用いて行なうPCRの至適化は最小限ですみ、または不要なこともあります（図 " 幅広い至適アニーリング温度"および" 異なったマグネシウム濃度への適応"）。
図参照
操作手順
HotStarTaq Master Mix Kitは簡便なマスターミックスフォーマットですので、操作は容易です。HotStarTaq DNA Polymeraseは、95℃、15 分間のインキュベーションステップで活性化され、このステップは既存のサーマルサイクリングのプログラムに容易に導入できます。マスターミックスを用いて、反応セットアップを室温で迅速かつ容易に行なえます。 25 µlのHotStarTaq Master Mixを各PCRチューブにピペットでいれ、RNaseフリー水（キットに付属）で希釈したプライマーとテンプレートDNAを25 µl添加します（図" HotStarTaq操作手順"）。ピペッティングステップは最小限に抑えられ、エラーとコンタミのリスクが減少し、スループット数と再現性が増加します。キットに付属の至適化済みのプロトコールにより、PCRセットアップを迅速かつ容易に行なえます。
図参照
アプリケーション
HotStarTaq Master Mix Kitは、増幅などの高度なアプリケーションを含む様々なアプリケーションに最適です：
- 複雑なゲノムテンプレート
- 複雑なcDNAテンプレート（例；RT-PCR）
- 低コピーのターゲット（例；シングルセルPCR）
- マルチプレックスPCR
裏付けデータと数値
HotStarTaq procedure.
The HotStarTaq procedure is fast and easy for maximum convenience.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets |
| realtimeorendpoint | Endpoint |
| mastermix | Yes |
| enzymeactivity | 5'-> 3' exonuclease activity |
| sampletargettype | Genomic DNA and cDNA |
| singleormultiplex | Single |
| reactiontype | PCR amplification |
| withwithouthotstart | With hotstart |
リソース
Certificates of Analysis (1)