Omniscript RT Kit
反応あたり50 ng ～ 2 μg のRNA を用いた逆転写反応（エンドポイントPCR用）
商業用のバルク製品、カスタマイズ製品、最適化された製品が必要ですか？ QIAGENでは、ロジスティクスやコンプライアンスなどのサポートも行っています。QIAGEN Strategic Partnerships & OEMにお問い合わせください。
Omniscript RT Kit (200)
カタログ番号 / ID. 205113
For 200 reverse-transcription reactions: 800 units Omniscript Reverse Transcriptase, 4 x 150 µl 10x Buffer RT, 4 x 100 µl dNTP Mix (contains 5 mM each dNTP), 4 x 1.1 ml RNase-free water
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反応
200
50
Omniscript RT Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- アフィニティーが高い酵素による高収量cDNA
- わずか10コピーのテンプレートも高感度で検出
- 追加のRNase H分解は不要
- 煩わしいピペッティング操作なしの迅速で簡単な製法
製品詳細
Omniscript Reverse Transcription（RT）Kitは、各反応あたり50 ngから2 µgのRNA量を用いた逆転写用に特別にデザインされています。RNAへのアフィニティーが高いOmniscript Reverse Transcriptaseは、他の逆転写酵素と比較して非常に優れた性能を示し、低いコピー数のテンプレートでさえ高感度なRT-PCRを実現します。Omniscript RT KitにはOmniscript Reverse Transcriptase、dNTPs、至適化済みの反応バッファーが含まれています。プライマーを添加するだけで迅速かつ簡単にcDNAを合成できます。
パフォーマンス
Omniscript Reverse Transcriptase （RT） の高いRNAアフィニティーによりコピー数の少ない転写物からでさえも、高効率および高感度のRT-PCR結果が得られるので（図" 10コピー以上の高感度なRT-PCR"）、温度あるいは反応条件の調整を行なわずに、複雑な二次構造を持つRNAでも、完全に読み取り、逆転写を実現します（図" 種々の逆転写酵素との比較"）。
その他の逆転写酵素では、GC含有率の高いRNA領域は逆転写が止まったりRNAテンプレートから解離したりする原因であり、またRNAのループ構造部分をスキップしてしまいます（図" 完全長のRT-PCR産物 — B"）。しかし、このような逆転写が困難なテンプレートも、QIAGENの逆転写酵素を使用すれば、逆転写が効率よく行なわれることが証明されています（図" 完全長のRT-PCR産物 — A"）。Omniscript RT Kitは、至適化なしで事実上問題なく逆転写が可能なキットです。
図参照
原理
RNAに対して高いアフィニティーを有するOmniscript Reverse Transcriptase（RT）は、どのようなテンプレートでも効率的で高感度の逆転写が可能であり、高収量のcDNAが得られます。dNTPsと至適化済みの反応バッファーが同梱されているため即使用可能であり、RNAに対するOmniscript RTの高いアフィニティーと相まって、高GC含量または複雑な二次構造のテンプレートの読み取りが実現しています。プライマーミックスは同梱されていなのでご注意ください。
Omniscript RTは、各反応あたり50 ngから2 µg のRNA量を用いた、あらゆる逆転写用に特別にデザインされています。多くのウイルスRNA調製にはキャリアRNAが存在するので、Omniscript RTは通常ウイルスRNAに最適な酵素です。比較実験においても、Omniscript RTは、幅広いRNAのスタート量で他の逆転写酵素より一定した優れた性能を示します。
Omniscript Kitsのロット間の再現性は、QIAGENの厳しい品質管理により保証されています。全てのOmniscript RT Kitsに添付されている至適化済みのBuffer RT、dNTPs、水はRNaseフリーの保証付きで、Omniscript RTの各ロットは、RT-PCRの再現性に関する多数の品質管理テストを受けています。
操作手順
Omniscript Reverse Transcriptaseの至適化済みの反応バッファーによって、手間のかかるピペッティングやプレインキュベーションステップが不要となり、RNase Hによる追加分解ステップも必要ありません（フローチャート" Omniscript Reverse Transcriptase製法"）。
図参照
アプリケーション
Omniscript Reverse Transcriptaseは以下のようなアプリケーションに最適です。
- エンドポイントPCR用cDNA合成
- クローニング用二本鎖cDNA合成
- RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)
- リニアRNA増幅
- RNAの指数的増幅
- SAGE (Serial Analysis of Gene Expression)
- マイクロアレイ用標識反応
- プライマーエクステンションによる転写開始部位解析
裏付けデータと数値
Full-length RT-PCR products — A.
RT-PCR was carried out with total RNA from maize leaves using the indicated RT reaction temperatures. A 1.2 kb fragment of the GC-rich maize gl2 transcript was amplified. RT was carried out using the standard Omniscript RT protocol at the standard (37°C) and higher reaction temperatures as indicated.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | RT-PCR, qRT-PCR, primer-extension, RACE analysis |
| realtimeorendpoint | Endpoint |
| mastermix | No |
| enzymeactivity | Reverse transcription |
| singleormultiplex | Single |
| withwithouthotstart | Without hotstart |
| reactiontype | Reverse transcription |
| sampletargettype | RNA template |
リソース
クイックスタートプロトコール (1)
MSDS (1)
キットハンドブック (1)
Application Notes (1)
Certificates of Analysis (1)