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TransMessenger Transfection Reagent (0.5 ml)
カタログ番号 / ID. 301525
For 60 transfections in 6-well plates or 80 transfections in 12-well plates
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TransMessenger Transfection Reagentは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- 効率の高いトランスフェクション
- 厳密な品質管理で再現性の高い結果を実現
- 初代神経細胞への効率的なトランスフェクション
製品詳細
TransMessenger Transfection Reagent は、真核細胞へのRNAトランスフェクションに即使用可能な脂質ベースの試薬です。DNAではなくRNAを用いた細胞へのトランスフェクションにより、トランスフェクション実験における新しいアプローチが可能になります。TransMessenger Reagentを用いた293T、Jurkat、Veroへのトランスフェクションは良好な結果が得られます。本製品は初代細胞（ヒト線維芽細胞、ラット心筋細胞、ラット神経細胞）へのRNAトランスフェクションにも使用できます。
パフォーマンス
TransMessenger Reagentは、操作を迅速かつ簡単にし、トランスフェクション効率を高めます（図" HeLa細胞におけるTransMessenger Reagent"）。RNA量はトランスフェクションを成功させるための重要な因子であることから、それぞれの細胞およびRNAの組み合わせにおいて、RNAとTransMessenger Transfection Reagent の至適化をお薦めします（図 " RNAおよびTransMessenger Reagent量とトランスフェクション効率の相関関係"）。この作業を簡便化するため、本試薬は、種々の培養細胞フォーマットで至適化を行なうための開始点と、至適化のガイドラインを示しています。
図参照
原理
TransMessenger Transfection Reagentは、特にRNAによる細胞のトランスフェクションを目的に開発された最初の試薬です。脂質をベースにしたTransMessenger Reagent は、RNAを縮合する特殊なエンハンサーと至適化されたバッファーを組み合わせて使用します。エンハンサーによりRNA分子は縮合された後、TransMessenger Reagentによりコーティングされ真核細胞へ効率良く移行します。RNase活性がないかどうか、ロット間に一貫性があるかどうか、エンドトキシンレベルが低い（≤10 EU/ml）かどうかをチェックするために、品質管理を厳格に行なっています。RNAトランスフェクションの効率に悪影響を及ぼすおそれのある試薬変数は、当社の厳格な基準で消去されています。
操作手順
TransMessenger Reagent の全ての試薬は即使用可能です。RNAをEnhancer RとBuffer EC-Rと混合し、室温で5分間インキュベート後、TransMessenger Reagent を添加してさらに5～10分間インキュベートするだけでTransMessenger-RNAトランスフェクションコンプレックスが形成されます。このコンプレックスを培養液と混合し、細胞に直接アプライします。3時間のインキュベーションの後に培地を交換し、細胞をさらにインキュベートして分析可能な状態にします。
DNA、タンパク質などの夾雑物を伴わない高純度なRNAを使用すれば、最適なトランスフェクション結果を得ることができます。RNeasy Kitsで精製したRNAの使用をお薦めします。
DNA、タンパク質などの夾雑物を伴わない高純度なRNAを使用すれば、最適なトランスフェクション結果を得ることができます。RNeasy Kitsで精製したRNAの使用をお薦めします。
アプリケーション
DNAではなくRNAを用いた細胞へのトランスフェクションにより、トランスフェクション実験における新しいアプローチが可能になります。トランスフェクトされたRNA配列は転写反応が行なわれることなく、またプロモーターに依存することなく発現されます。さらに、DNAよりRNAをトランスフェクトした場合の方が通常より早くタンパク質が発現されます。TransMessenger Transfection Reagentを用いたRNAトランスフェクションは以下の方法に使用できます。
- プラスミドDNAを効率的にトランスフェクトできない細胞の研究
- RNA機能の直接研究
裏付けデータと数値
Amount of RNA and TransMessenger Reagent vs. transfection efficiency.
Optimization experiments were performed in CHO-K1 cells. Cells (2 x 104) were seeded in quadruplicate into 96-well plates and transfected 24 hours later with an in vitro-transcribed CAT-encoding RNA using [A] increasing amounts of RNA with 1.5 µl TransMessenger Reagent and [B] increasing amounts of TransMessenger Reagent with 0.25 µg RNA, as described in the TransMessenger Transfection Reagent Handbook. CAT activity was measured 24 hours post-transfection.
仕様
| 特徴 | 仕様 |
|---|---|
| applications | Direct studies of RNA function |
| features | Transfection with RNA. Efficient transfection of neuronal cells. |
| controls | Not included |
| nucleicacid | RNA |
| celltype | Eukaryotic cells |
| numberofpossibletransfections | 80 transfections in 12-well plates / 0,5 ml reagent |
| technology | Lipid-based formulation in conjunction with a RNA-condensing enhancer |
| transfectiontype | Transient transfection, co-transfection |
リソース
Transfection Protocols (2)
キットハンドブック (1)
パンフレット (3)
クイックスタートプロトコール (1)
MSDS (1)
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)