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Qproteome Cell Compartment Kit
N° de réf. / ID. 37502
Pour 10 fractionnements sous-cellulaires maximum : tampon d’extraction, solution d’inhibiteur de la protéase, Benzonase®.
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Le règlement REACH (CE 1907/2006 Annexe XIV) s’applique aux substances réglementées que contient ce produit. L’utilisation de ce produit au sein de l’UE est soumise à une exemption (article 56(3)). Pour plus d’informations, consultez le règlement REACH ainsi que la fiche de données de sécurité de ce produit, que vous trouverez dans la section « Ressources » de cette page.
Le Qproteome Cell Compartment Kit est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.
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Détails produit
Les cellules eucaryotes sont des systèmes hautement structurés, complexes et bien organisés. Le kit de compartiment cellulaire est conçu pour un fractionnement sous-cellulaire rapide et facile des cellules eucaryotes et tissus intacts. Grâce à l’ajout consécutif de différents tampons d’extraction à un culot cellulaire, il est possible d’isoler les protéines de façon sélective dans les différents compartiments cellulaires.
Performances
Le Qproteome Cell Compartment Kit permet la localisation simple et efficace de protéines de marqueur propres à un compartiment cellulaire à partir de cellules isolées (voir les illustrations Séparation spécifique de protéines de marqueur et Localisation de protéines dans des cellules dans diverses conditions de croissance) ou à partir d’échantillons de tissus (voir l’illustration Localisation de protéines dans des échantillons de tissus).
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Principe
Le kit contient 4 tampons d’extraction, ce qui permet l’isolement séquentiel des protéines associées au cytosol, aux membranes, au noyau et au cytosquelette à partir de lysats cellulaires ou de tissus.
Procédure
Les 4 tampons d’extraction sont ajoutés consécutivement à un culot cellulaire puis les fractions correspondantes sont isolées par centrifugation (voir le schéma).
Dans un autre protocole pour les tissus, les échantillons sont simultanément homogénéisés et désintégrés à l’aide du TissueRuptor avant d’être traités comme le culot cellulaire.
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Applications
Le fractionnement sous-cellulaire de protéines peut être utilisé pour l’enrichissement d’espèces peu abondantes ; pour définir la localisation sous-cellulaire d’enzymes, de protéines régulatrices et de protéines structurales ; et pour surveiller la redistribution compartimentée des biomolécules dans des conditions de base et de stimulation.
Données et illustrations utiles
Localisation de protéines dans des cellules dans diverses conditions de croissance.
Micrographies (volets supérieurs) des cellules HeLa [A] en conditions de croissance normale et [B] après 4 heures d’incubation avec de la staurosporine, un inducteur de l’apoptose. Les volets inférieurs montrent les transferts de western préparés après que les lysats cellulaires ont été traités avec le Qproteome Cell Compartment Kit. Les transferts ont été sondés avec un anticorps anti-cytochrome c. On sait que, au cours de l’apoptose, le cytochrome c est transloqué de l’espace intermembranaire mitochondrial au cytosol, un processus révélé par la détection du cytochrome c dans la fraction cytosolique des cellules apoptotiques.
Spécifications
| Caractéristiques | Spécifications |
|---|---|
| applications | SDS-PAGE, spectrométrie de masse |
| fractionsisolated | Quatre fractions |
| startmaterial | Lysat cellulaire |
| samplesize | ~ 5 × 10e6 cellules |
| bindingcapacityyield | Variable |
| species | Eucaryotes |
Ressources
Safety Data Sheets (1)
Kit Handbooks (2)
Technical Information (1)
Quick-Start Protocols (1)
Scientific Posters (1)
Certificates of Analysis (1)