Microbial DNA qPCR Arrays

リアルタイムPCR によるアプリケーション特異的な微生物の同定およびプロファイリング

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Microbial DNA qPCR Arrays

カタログ番号 / ID.   330261

Array plate and master mix for detection of microbial species or genes
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Microbial DNA qPCR Arraysは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴

  • 微生物種、毒性因子の遺伝子、または抗生物質耐性遺伝子の同定
  • さまざまなサンプルに対応する操作手順
  • コントロールアッセイを含むことにより信頼できる結果

製品詳細


Microbial DNA qPCR Arrays は、様々なサンプルから関連した微生物種、病原性因子の遺伝子、または抗生物質耐性遺伝子の同定およびプロファイリングするためのアレイです。Microbial DNA qPCR Arrays は、様々なサンプルから関連した微生物種、病原性因子の遺伝子、または抗生物質耐性遺伝子の同定およびプロファイリングするためのアッセイパネルです。種の同定用アッセイは、バクテリアの16S rRNA遺伝子および真菌のrRNA遺伝子をターゲットとし、各アレイには、ホストDNA、バクテリアDNAの含有、PCR反応を確認するためのコントロールが含まれています。また、このキットには、Microbial qPCR Mastermixが含まれています。本アレイの簡便な操作手順は、リアルタイムPCRを使用するいかなる実験室においても、ルーチンで信頼できる微生物遺伝子の同定またはプロファイリングを可能にします。

パフォーマンス

直線性のあるダイナミックレンジ
10~106 コピーのDNAテンプレートと、Microbial DNA qPCR Assaysを用いた増幅の結果は直線性を示しました(図   Microbial DNA qPCR Assaysの感度と直線性)。

定量下限(Lower limit of quantification;LLOQ)
LLOQとは標準曲線の直線状にのる下限濃度です(図 検出限界と定量下限)。全てのMicrobial DNA qPCR Assaysのうち、93%が100コピー以下のLLOQを示しました(図   高感度であることを示す全Microbial DNA qPCR AssaysのLLOQ)。微生物同定用のアッセイでは92%、毒性因子遺伝子のアッセイは95%、抗生物質耐性遺伝子のアッセイの97%が100コピー以下の定量下限を示しました(図  高感度であることを示す微生物同定用Microbial DNA qPCR AssaysのLLOQ 高感度であることを示す毒性因子遺伝子検出用Microbial DNA qPCR AssaysのLLOQ、および 高い感度を示す抗生物質耐性遺伝子検出用Microbial DNA qPCR AssaysのLLOQ )。

特異性
それぞれのMicrobial DNA qPCR Assayはターゲットとなる種および遺伝子を一つだけ検出するように厳密に検証されています(図 Microbial DNA qPCR Assays の高い特異性)。その他のターゲットも検出するアッセイについては、in silicoで予測された検出対象ターゲットがspecifications sheetに記載されています。

この特異性は、糞便、唾液および歯垢のような複雑な生物種を持つサンプルにおいても維持され(図 複雑なメタゲノム使用中の定量にも有効な高感度Microbial DNA qPCR Assays)、様々なシークエンス法でも検証されています(図 パイロシークエンシングによるAntibiotic Resistance Genes Microbial DNA qPCR Array特異性の検証)。

再現性
Microbial DNA qPCR Assaysは同一個体内比較および個体間比較を検証しており、どちらも高い再現性を示します (図 Microbial DNA qPCR Arraysによる信頼できる高い再現性)。
図参照

原理

Microbial DNA qPCR Assaysは種を同定するために、バクテリアの16S rRNA遺伝子、真菌のrRNA遺伝子配列、病原性因子の遺伝子および抗生物質耐性遺伝子をプライマーおよび加水分解プローブを用いたPCR増幅で検出するようにデザインされています。

Microbial DNA qPCR Arraysは96または384ウェルプレートで関連性の高いアッセイ(例:呼吸器感染に関連する微生物種や、生物防御研究に関する病原体など)で構成されています。各プレートには、確実な結果を得るため、真菌、バクテリアおよび宿主ゲノムDNAの存在コントロール、PCR反応の確認コントロールが含まれております。

操作手順

Microbial DNA qPCR Arrayの操作は簡便で、さらに一般のラボにあるリアルタイムPCR装置にそのまま使用できます。DNAはサンプル種に適応するQIAampキットを用いて抽出し、適切なMicrobial qPCR Mastermixと混合します。反応ミックスをアレイプレートに分注し、リアルタイムPCRによりそれぞれのアッセイから生のCT値が得られます。サンプル中の微生物種または遺伝子の同定およびプロファイリングを行なうことが出来ます。

アプリケーション

Microbial DNA qPCR Arraysは様々なサンプル中の微生物種または遺伝子の同定およびプロファイリングに最適です。たとえば、Vaginal Flora Microbial DNA qPCR Arrayは、細菌性膣炎の基本的な原因の解明に使用でき(図   Vaginal Flora Microbial DNA qPCR Arrayによる頸部スワブサンプルの正確なプロファイリングおよび Gardnerella vaginalis陽性時では正常時と比較して、共生微生物と細菌性膣炎に関連する微生物種が変化)、Antibiotic Resistance Genes Microbial DNA qPCR Arrayは、腸内または汚泥サンプル中のこれらの遺伝子の同定に有効です(図  Microbial DNA qPCR Arrayによる抗生物質耐性遺伝子が存在する腸内微生物叢のスクリーニングおよび Antibiotic Resistance Genes Microbial qPCR Arrayによる下水サンプル中抗生物質耐性遺伝子の同定)。
図参照

裏付けデータと数値

リソース

ダウンロードファイル (20)
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
ウェビナー (1)
The work presented here thus offers an original assessment of the dynamics at play in the tree phyllosphere.
解析用ソフトウェア (1)
パンフレット (2)
Microbial product configurator guide
For application-specific microbial identification and profiling by real-time PCR
テクニカルインフォメーション (2)
キットハンドブック (1)
For real-time PCR-based profiling/detection of microbial species, antibiotic resistance genes or virulence factor genes
Certificates of Analysis (1)