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miRNeasy Tissue/Cells Advanced Micro Kit (50)
カタログ番号 / ID. 217684
For 50 preps: RNeasy UCP MinElute spin columns, gDNA Eliminator Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers
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カラムタイププレートタイプ
Micro
Mini
96 well
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitsは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- フェノールフリーなプロトコールのため相分離やドラフトでの作業が不要
- 特長的なgDNA Eliminator Columnにより迅速で効率的な手順
- miRNAおよび200塩基未満のRNAを効率的に濃縮
- すべてのダウンストリーム解析に適したRNA精製
製品詳細
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitは、定評のあるmiRNeasy Kitの第二世代です。より安全に、そして効率的にRNA精製をするために、フェノールフリーの技術とgDNA Eliminator Columnを組み合わせたものです。少量サンプルを含む、動物組織や細胞から18塩基以上のスモールRNAを含むトータルRNAの精製を可能にします。
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitは、ロースループットのRNA精製ではスピンカラムを使用し、ハイスループットの精製ではQIAcube Connectで自動化できます。
パフォーマンス
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitは、従来のmiRNeasy Kitに代わるフェノールフリーキットで、RNAの収量と品質に妥協はありません。（図「 フェノール不要で高収量miRNA」および「 miRNeasy Tissue/Cells Advanced Microを使用してフェノール不要で組織や細胞からmiR16の高収量」を参照）。miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitは、およそ18塩基までのRNAを効率良く濃縮できます。
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Micro Kitは、最大5 mgの凍結組織または1 x 106個の細胞からRNAを効率良く精製しますが、サンプルが少量の場合でも精製することができます。miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kitは、最大30 mgの凍結組織または1 x 107個の細胞からRNAを効率良く精製します。
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitには、高感度なアプリケーション用にゲノムDNAの効率良い除去、かつ高収量で再現性の高いRNA精製を可能にするgDNA Eliminatorの手順が含まれます（図「 miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kitでの高パフォーマンス」および「 トータルRNAの精製：ゲノムDNAの効果的な除去」を参照）。通常、組織や培養細胞からAgilent RIN値が10に近いトータルRNAが得られます。他社キットとは異なり、miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kitは、RNAの品質と収量を妥協することなく、使いやすさとフェノールフリーのプロトコールを組み合わせています（図「 miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kitは、他社キットよりも優れたパフォーマンスを示す」、「 優位性のあるパフォーマンス」、「 迅速な手順」を参照）。
図参照
High recovery of miRNA without the need for phenol
High recovery of miR16 from tissues and cells without the need for phenol.
The miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kit shows higher performance.
Total RNA extraction: effective genomic DNA removal
The miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kit shows better performance compared to kits from other supplies.
Competitive performance
Fast procedure
High recovery of miR16 from tissues and cells without the need for phenol.
The miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kit shows higher performance.
Total RNA extraction: effective genomic DNA removal
The miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini Kit shows better performance compared to kits from other supplies.
Competitive performance
Fast procedure
原理
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitは、グアニジンベースのサンプル溶解と、阻害剤除去のステップやシリカメンブレンベースのトータルRNA精製（miRNAとその他スモールRNAを含む）を組み合わせています。キットに同梱のBuffer RLTは、RNaseなどのタンパク質の溶解と変性を促進するグアニジンチオシアン酸塩を含んでいます。そのため、Buffer RLTで溶解したサンプル内のRNAは安定的で、分解から保護されます。
操作手順
サンプルの完全な溶解とRNaseの不活化を確実に行うために、組織や細胞サンプルにBuffer RLTを添加し、続いて徹底した破砕とホモジナイゼーションを行います（図「 miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitの手順」を参照）。 次に、Buffer ALを溶解液に添加し、gDNA Eliminator Spin ColumnでgDNAの除去を行います。サンプルの種類や量によりますが、カラム上でDNase処理のオプションを実行できます（本キットには含まれていません）。Buffer RPPをフロースルーに添加し、阻害物質（主に組織や細胞サンプル内に高濃縮に存在し、RNA分離やダウンストリームの解析に影響を与える可能性のあるタンパク質）を遠心分離で沈殿させます。トータルRNAを含む上清を新しい反応チューブに移し、18塩基以上のすべてのRNA分子に適した結合条件にするため、イソプロパノールを添加します。その後、サンプルをRNeasy Mini Spin Column（miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini）またはRNeasy UCP MinElute Spin Column（miRNeasy Tissue/Cells Advanced Micro）に添加し、トータルRNAをメンブレンに結合させ、夾雑物はすべて効率的に洗浄されます。miRNAやその他のスモールRNAを含む高品質なRNAは少量のRNase-Free Waterで溶出します。
図参照
アプリケーション
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kitは、以下を含むさまざまなアプリケーション用のmiRNAやトータルRNAの精製を可能にします。
- RNAシーケンス
- 定量、リアルタイムRT-PCR
- マイクロアレイ解析
- ノーザンブロット解析
| 機能 | miRNeasy Tissue/Cells Advanced Micro | miRNeasy Tissue/Cells Advanced Mini |
| アプリケーション | NGS、リアルタイムRT-PCR、マイクロアレイ | NGS、リアルタイムRT-PCR、マイクロアレイ |
| 溶出量 | 既定値 20 µl, 最小値 10 µl | 30 µl |
| フォーマット | スピンカラム | スピンカラム |
| 主なサンプルの種類 | 組織、細胞 | 組織、細胞 |
| 処理 | 手動（遠心分離）、自動（QIAcube Connect） | 手動（遠心分離）、自動（QIAcube Connect） |
|
精製産物 |
miRNA、トータルRNA | miRNA、トータルRNA |
| サンプル量 | 最大 5 mg の組織、最大 1 x 106 個の細胞 |
最大 30 mg の凍結組織（15 mg 安定化）、 最大 1 x 107 個の細胞 |
裏付けデータと数値
miRNeasy Tissue/Cells Advanced Kit procedure
A fast and phenol-free workflow enables microRNA and total RNA isolation including genomic DNA removal.
リソース
キットハンドブック (2)
クイックスタートプロトコール (2)
アプリケーション／プロトコール (1)
パンフレット (2)
Certificates of Analysis (1)
出版物
Accurate isoform discovery with IsoQuant using long reads.
Nat Biotechnol; 2023; 41 (7):915-918 2023 Jan 2 PMID:36593406
Cancer cell autophagy, reprogrammed macrophages, and remodeled vasculature in glioblastoma triggers tumor immunity.
Cancer Cell; 2022; 40 (10):1111-1127.e9 2022 Sep 15 PMID:36113478
Developmental defects in Huntington's disease show that axonal growth and microtubule reorganization require NUMA1.
Neuron; 2021; 110 (1):36-50.e5 2021 Nov 17 PMID:34793694
T-cell trans-synaptic vesicles are distinct and carry greater effector content than constitutive extracellular vesicles.
Nat Commun; 2022; 13 (1):3460 2022 Jun 16 PMID:35710644
Circulating microRNA signatures associated with disease severity and outcome in COVID-19 patients.
Front Immunol; 2022; 13 :968991 2022 Aug 11 PMID:36032130