QuickLyse Miniprep Kit zur Extraktion von Plasmid-DNA
Zur schnellen Aufreinigung von bis zu 15 µg Plasmid in Sequenzierqualität
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QuickLyse Miniprep Kit (250)
Kat.-Nr. / ID. 27406
250 QuickLyse Spin Columns, Reagenzien, Puffer, Lyse- und Collection Tubes (2 ml)
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QuickLyse Miniprep Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.
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Eigenschaften
- Schnelles einstufiges Lyseverfahren
- Weniger Protokollschritte und weniger Zeitaufwand für die Handhabung
- Bis zu 15 µg DNA aus 1,5 gewonnenen Kulturvolumina
- Gebrauchsfertige Plasmid-DNA in nur 9 Minuten
Angaben zum Produkt
Das QuickLyse Miniprep Kit bietet ein schnelles, auf einer Spin-Säule basierendes Verfahren zur Isolierung von Plasmid-DNA in Sequenzierqualität. Resuspension von Bakterienzellen, Lyse und DNA-Bindung werden in einem einzigen Puffer durchgeführt, was zur schnellen DNA-Aufreinigung bei minimalem Zeitaufwand führt.
Leistung
Das QIAGEN QuickLyse Miniprep Kit arbeitet mit einer einstufigen Lyse-Technologie für die ultraschnelle Präparation von bis zu 15 µg Plasmid-DNA. Die Qualität der DNA gewährleistet eine robuste Leistung bei Anwendungen wie Sequenzierung, Restriktionsanalysen und Klonierung (siehe Abbildung „ Reproduzierbare Ausbeuten“).
Das QuickLyse Miniprep Kit liefert ausreichend Plasmid-DNA für alle nachgelagerten Anwendungen, einschließlich der Sequenzierung (siehe Abbildung „Lange Leselängen bei automatisierter Sequenzierung“). Aus 1,5 ml Bakterienkultur können bis zu 15 µg Plasmid-DNA mit hoher Kopienzahl gewonnen werden (siehe Abbildung „Hohe Ausbeute an hochwertiger Plasmid-DNA“). Die isolierte Plasmid-DNA weist ein OD260/280-Verhältnis von 1,7–1,9 auf, was bedeutet, dass die Qualität und Reinheit sich für alle sensitiven Anwendungen eignet. Es lassen sich leicht Sequenzierleselängen von mehr als 700 Basen erreichen.
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Prinzip
Im Gegensatz zu den meisten mit dreistufigen Lyseverfahren arbeitenden Protokollen kombiniert das QuickLyse Miniprep Kit enzymatische und osmotische Prozesse zur Lyse von Bakterienzellen in einem einzigen, dreiminütigen Schritt. Darüber hinaus benötigt die QuickLyse-Technologie weniger Puffer, was die Handhabung vereinfacht und Zeit spart: Die Herstellung von 24 Minipräps von Plasmid-DNA kann in weniger als 22 Minuten erfolgen.
Verfahren
Die Bakterienzellen werden resuspendiert und lysiert, und die DNA wird in einem einzigen Puffer gebunden, was eine schnelle DNA-Aufreinigung mit minimalem Zeitaufwand ermöglicht. Nach einem dreiminütigen Lyseschritt wird das bereinigte Lysat direkt auf eine QuickLyse Spin Column aufgetragen. Die Plasmid-DNA bindet an die Säulenmembran und wird nach einem einzigen Waschschritt eluiert (siehe Flussdiagramm „ QuickLyse-Verfahren“). Die isolierte DNA kann direkt für Standardanwendungen wie automatische Sequenzierung, PCR, Restriktionsanalyse und Klonierung verwendet werden.
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Anwendungen
Das QuickLyse Miniprep Kit liefert ausreichend Plasmid-DNA für jede nachgeschaltete Anwendung, einschließlich der automatischen Sequenzierung.
Ergänzende Daten und Abbildungen
Hohe Ausbeuten an hochwertiger Plasmid-DNA.
Typische DNA-Ausbeute und -Reinheit aus 1,5 ml Bakterienkultur (LB-Medium) für verschiedene Zellen und Vektoren.
Spezifikationen
| Eigenschaften | Spezifikationen |
|---|---|
| applications | Automatisierte Sequenzierung, PCR, Restriktionsanalyse, Klonierung usw. |
| timeperrunorprepperrun | 9 min |
| culturevolumestartingmaterial | 1,5 ml Kulturvolumen |
| plasmidtype | Cosmid-DNA mit hohem Kopienanteil |
| elutionvolume | 50 µl |
| samplesperrunthroughput | 1–24 Proben pro Lauf |
| technology | QuickLyse Technologie |
| yield | Bis zu 15 µg |
| processing | Manuell (Zentrifugation) |
Ressourcen
Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)