QIAquick Nucleotide Removal Kit

• Rückgewinnung von gebrauchsfertiger DNA von bis zu 95 %
• Schnelles und praktisches Verfahren
• Reinigung von DNA von bis zu 10 kb Länge in drei einfachen Schritten
• Gel-Ladefarbstoff für komfortable Probenanalyse

Das QIAquick Nucleotide Removal Kit enthält Spin-Säulen, Puffer und Sammelröhrchen für die Silikamembran-basierte Aufreinigung von Oligonukleotiden und DNA. Nicht inkorporierte Nukleotide, Salze und andere Kontaminanten werden entfernt, und Oligonukleotide (> 17 nt) und DNA-Fragmente der Größe 40 bp bis 10 kb werden durch einfaches und schnelles Verfahren mit den Schritten „Binden-Waschen-Eluieren“ mit einem Elutionsvolumen von 30–200 µl aufgereinigt. Das Verfahren ist auf dem QIAcube Connect vollständig automatisiert.

Das QIAquick-Verfahren zur Nukleotidentfernung beseitigt Nukleotide, Enzyme, Salze und andere Verunreinigungen aus DNA-Proben (siehe Abbildung „ Vollständige Entfernung von Nukleotiden aus markierten Oligonukleotiden“). Mithilfe einer Mikrozentrifuge wird 17mer bis 10 kb DNA aufgereinigt. Für Probenvolumen kleiner als 50 µl kann auch das DyeEx Spin Kit verwendet werden.

QIAquick Kits enthalten eine Silika-Membraneinheit für die Bindung von DNA in Hochsalzpuffer und die Elution mit Niedrigsalzpuffer oder Wasser. Durch die Aufreinigung werden Primer, Nukleotide, Enzyme, Mineralöl, Salze, Agarose, Ethidiumbromid und andere Verunreinigungen aus DNA-Proben entfernt (siehe Abbildung „ Vollständige Entfernung von Nukleotiden aus markierten Oligonukleotiden“). Die Silika-Membrantechnologie beseitigt die Probleme und Schwierigkeiten, die mit losen Harzen und Suspensionen verbunden sind. Spezialisierte Bindepuffer sind für spezifische Anwendungen optimiert und fördern die selektive Adsorption von DNA-Molekülen innerhalb bestimmter Größenbereiche.

Gel-Ladefarbstoff

Der mitgelieferte Gel-Ladefarbstoff ermöglicht eine schnellere und bequemere Verarbeitung und Analyse der Proben. Der GelPilot Loading Dye enthält drei Farbstoffe zur Nachverfolgung (Xylencyanol, Bromphenolblau und Orange G), um die Optimierung der Agarosegel-Laufzeit zu erleichtern und zu verhindern, dass kleinere DNA-Fragmente zu weit migrieren (siehe Abbildung „ GelPilot Loading Dye“).

Das QIAquick System nutzt ein einfaches Verfahren mit den Schritten „Binden-Waschen-Eluieren“ (siehe Flussdiagramm „ QIAquick-Verfahren zur Oligonukleotidentfernung“). Der Bindepuffer wird der Probe direkt zugesetzt und die Mischung wird auf die QIAquick Spin Column aufgetragen. Die Nukleinsäuren werden unter den Hochsalzbedingungen des Puffers an die Silikamembran adsorbiert. Verunreinigungen werden durch Waschen entfernt, und die reine DNA wird in einem kleinen Volumen des mitgelieferten Niedrigsalzpuffers oder mit Wasser eluiert und kann direkt für alle nachfolgenden Anwendungen genutzt werden.

Handhabung

QIAquick Spin Columns sind so konzipiert, dass sie zwei praktische Optionen für die Handhabung bieten. Die Spin-Säulen passen in eine herkömmliche Tisch-Mikrozentrifuge. Das QIAquick Nucleotide Removal Kit sowie andere QIAGEN Kits auf Basis von Spin-Säulen können auf dem QIAcube Connect vollständig automatisiert werden, was eine höhere Produktivität sowie eine Standardisierung der Ergebnisse ermöglicht (siehe Abbildungen „Handhabungsoptionen für Spin-Säulen  A“ und „ QIAcube Connect“).

Die mit dem QIAquick System aufgereinigten DNA-Fragmente können direkt für alle Anwendungen verwendet werden, darunter Sequenzierung, Microarray-Analyse, Ligation und Transformation, Restriktionsverdau, Markierung und Mikroinjektion.